摘要：目的　建立一种简单快速、准确可靠、经济实用的检测常见缺失型α-地中海贫血(α-地贫)突变(- - SEA、- α3.7和- α4 .2 )的单管多重PCR技术以用于α-地贫的分子筛查和产前诊断。方法　采用gap- PCR方案设计4组PCR引物并对PCR反应条件进行系统优化以扩增代表这3种地贫和α2 基因存在的特异性DNA片段。此外,还设计1对引物扩增L IS1基因3′-端非翻译区片段作为整个PCR体系扩增成功与否的内在对照。采用盲法分析对该技术的特异性、准确性和可靠性进行评价并应用于产前分子诊断中。结果　所建的单管多重PCR技术成功地检出这3种常见缺失型α-地贫突变的纯合子、杂合子和双重杂合子。正常人出现L IS1和α2 基因特异扩增片段,而- - SEA、- α3.7和- α4 .2杂合子除了出现正常人的2条扩增带外,还分别出现1条指示这些突变存在的特异性扩增片段。盲法分析结果显示,该技术对α-珠蛋白基因型经过Southern印迹法或DNA直接测序确证的DNA标本的诊断准确性达到10 0 % ,并被成功地应用于9个重症α-地贫高风险家庭的产前诊断中。结论　该技术可准确、快速地检测- - SEA、-α3.7和-α4 .2 3种常见缺失型α-地贫突变,且具有经济和实用的优点,非常适合于α-地贫的大人群分子筛查和临床样品的基因诊断。

摘要：目的　建立一种准确快速并能同时检测中国人 3种常见缺失型 α-地中海贫血 (简称 α-地贫 )的聚合酶链式反应 ( PCR)技术并应用于产前 α-地贫的人群筛查和高危胎儿的产前诊断中。　方法　采用跨越断裂点 PCR( gap- PCR)方案设计 3组 PCR引物 ,并对 PCR反应条件进行优化以扩增代表这 3种 α-地贫存在的特异性 DNA片段。应用血液学分析法对孕妇及其配偶各 6 135例进行 α-地贫表型的初筛 ,gap- PCR法用于 α-地贫表型阳性病例的确诊和 32例 α-地贫高风险胎儿的产前诊断。　结果　一次 PCR同时成功地检出 3种 α-地贫的纯合子、杂合子或双重杂合子 ;孕妇及其配偶中共筛出 5 4 1例携有 - - SEA突变基因 ,及其 Hb Bart s和 Hb H病的高风险胎儿 17例和 15例 ,并对其中的 31例进行了产前诊断 ,5例 Hb Bart s水肿胎儿和 4例 Hb H病胎儿被终止妊娠。　结论　该法简便快速、准确可靠、重复性好 ,适合于人群筛查时检出 α-地贫携带者和高风险重症

摘要：β地贫是一种分子病理具有高度异质性的、我国南方最为常见的遗传性血液病.在已发现的23种β地贫突变中,CD41-42(-TCTT)移码突变基因频率最高(达41.6%).根据PCR原理和该突变的特点,作者设计了一对引物进行PCR特异扩增,电泳分析即可检出此种突变.并引进基因释放剂DNA模板快速制备法,从而使此技术更为简便和实用.作者运用此法检测了广东珠海地区114份β地贫样品,CD41-42突变捡出率为40.35%,并成功地应用于产前诊断中.根据实验结果,作者建议在分析未知β地贫突变时,首先采用本法先对CD41-42突变进行初筛,而将RDB和ASO技术作为补充.