摘要：采用PCR方法对某蛋鸡场送检感染鸡进行实验室诊断,针对禽白血病病毒逆转录酶3’区域设计鉴定内外源病毒共同下游引物H5,针对ALV-J亚群gp85囊膜糖蛋白基因保守区域设计上游引物H7,A-E亚群gp85囊膜糖蛋白基因保守区域设计上游引物AD1,提取肝脏病料中核酸进行PCR扩增,测序分析结果表明为内源性禽白血病病毒感染。

摘要：为研究新城疫病毒NP、P和L蛋白作用机理和新城疫病毒反向遗传操作系统,构建新城疫病毒La Sota株NP、P和L基因的真核表达载体。根据GenBank中新城疫La Sota株的全长序列(JF950510.1),设计4对特异性引物,用RT-PCR法扩增出新城疫病毒La Sota株的NP、P和L基因,将其克隆到真核载体pCl-neo上。通过酶切和测序验证克隆正确,得到重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L,瞬时转染到BHK-21细胞中。经RT-PCR、Western blot、间接免疫荧光试验分别检测NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。经上述三种方法分别检测到NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达。重组质粒pCl-NP、pCl-P和pCl-L构建成功,为后期新城疫病毒反向遗传操作系统的构建奠定了基础。

摘要：利用本实验室分离、鉴定并保存的鸭疫里默氏杆菌血清1型湖北云梦分离株(RA-YM),根据GenBank上的序列设计了1对引物,用PCR方法扩增了RA-YM株的主要外膜蛋白OmpA基因,并克隆到pMD18-T载体,序列测定结果表明OmpA基因全长1152bp,序列同源性分析表明该基因相当保守,与其他不同RA菌株OmpA基因之间的核苷酸序列同源性为93%～97%。用pGEX-KG构建了原核表达载体pKG-OmpA,在大肠杆菌中进行了高效表达,表达蛋白约占菌体总蛋白的30%,主要为包涵体形式。SDS-PAGE电泳结果显示表达的融合蛋白大小约为68000,Western-blot结果表明该表达蛋白具有抗原性。

摘要：根据规模化生态养鸡特点,编制出适宜广泛推广和高效生态养鸡"553模式"。说明了模式编制的意义和内涵,并就生态养鸡关键技术和要点即主推品种、生产方式、鸡舍设计与设施配套、饲养管理、生产的组织形式、生态养鸡的生产方式认定等作出了解读。

摘要：为建立区分MG弱毒疫苗株F株和非F株以及滑液囊支原体的方法,试验通过分析NCBI上公布的MG和MS基因序列,优选合适的基因序列设计合成了MG弱毒疫苗株F株特异性引物、非F株MG通用引物、MG通用引物以及MS通用引物,各引物扩增条带大小分别为750、585、279和421bp,建立了可以区分MG弱毒疫苗株F株与非F株以及滑液囊支原体的PCR检测方法。结果显示:各引物的特异性或通用性良好,检测限度可以达到100fg/μL。研究表明,该试验建立的四重PCR检测方法可用于MG弱毒疫苗株F株与非F株的鉴别诊断以及滑液囊支原体的检测,为该病的净化提供技术支持。