摘要：建立一种针对副溶血弧菌bla_(CARB-17)和toxR基因的双重PCR检测方法。按照副溶血弧菌的bla_(CARB-17)和toxR基因序列设计并合成引物,于同一反应体系中进行PCR扩增,优化退火温度、退火时间和引物比例,确定双重PCR的特异性和灵敏性,最后用实验室分离鉴定的副溶血弧菌分离株验证。结果表明:建立的双重PCR最佳退火条件是52℃30 s,引物比例1∶1,在同一体系中特异地扩增出副溶血弧菌的bla_(CARB-17)和toxR基因的303、350 bp片段,其它对照菌株均无扩增,表明该方法特异性良好。双重PCR的最低检测限达1×10~2 CFU/mL,对实验室鉴定的56个副溶血弧菌分离株验证均为阳性。建立的双重PCR方法操作简单、高效快速、特异性强,适用于副溶血弧菌的检测。

摘要：利用环介导等温扩增技术建立肠炎沙门菌快速检测方法。根据肠炎沙门菌SEN1393基因特异序列设计引物,用凝胶电泳测试实验结果,再优选反应体系,最后检测牛乳样品中肠炎沙门菌。试验结果显示该方法能够在60℃条件下1 h内检出肠炎沙门菌,对5株沙门菌和27株非沙门菌检测,只有肠炎沙门菌可以检测出阳性扩增,所设计的引物有良好的特异性;DNA检测灵敏度为94 fg/μL。该方法具有高效、特异性强和敏感性高等特点,可满足肠炎沙门菌快速检测筛选的要求。

摘要：目的:利用环介导等温扩增技术建立食品中酸土环脂芽孢杆菌快速检测方法。方法:针对酸土环脂芽孢杆菌16S序列设计特异引物,再优选反应体系,用显色法检测实验结果。结果:该方法能够在63℃条件下1 h内检出食品中酸土环脂芽孢杆菌,所设计的引物有良好的特异性;灵敏度达6.7 CFU/m L(弱阳性)。结论:该方法具有高效、特异性强和敏感性高等特点,可满足酸土环脂芽孢杆菌快速检测筛选的要求。