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pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒的构建及鉴定: 收藏
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引用; 《医学理论与实践》2022年第4期35卷 544-547页; 作者：周连仲刘冲苏玢王明辉天津市第四中心医院南开大学附属第四中心医院天津市耳鼻咽喉头颈外科医院耳鼻咽喉头颈外科300140 天津市第四中心医院南开大学附属第四中心医院天津市耳鼻咽喉头颈外科医院麻醉科300140; 目的:为了研究软骨调节素Ⅰ的生物学作用,构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒。方法:用Trizol法提取大鼠软骨组织总RNA,根据ChM-Ⅰ基因序列(序列号:AF051425)设计特异引物,通过PCR获取ChM-Ⅰ目的基因,分别将ChM-Ⅰ目的基因的PCR产物和pcDNA...; 目的:为了研究软骨调节素Ⅰ的生物学作用,构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒。方法:用Trizol法提取大鼠软骨组织总RNA,根据ChM-Ⅰ基因序列(序列号:AF051425)设计特异引物,通过PCR获取ChM-Ⅰ目的基因,分别将ChM-Ⅰ目的基因的PCR产物和pcDNA3.1(+)质粒双酶切,并将两者定向连接,构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ质粒,转化感受态细菌,挑取阳性单克隆并扩增,酶切鉴定阳性克隆,并对插入的ChM-Ⅰ片段进行测序。结果:结果显示与ChM-Ⅰ基因长度相符,序列无误,且读码框正确。结论:成功构建pcDNA3.1(+)/ChM-Ⅰ表达质粒,为进一步研究ChM-Ⅰ的生物学作用打下基础。; 来源：详细信息评论

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