摘要：目的:构建靶向NIPSNAP3A的短发夹RNA(shRNA)腺病毒载体,干扰HEK293A细胞中NIPSNAP3A的表达。方法:设计靶向NIPSNAP3A的shRNA,插入穿梭质粒pENTRY,通过Gateway法获得腺病毒颗粒pAd-NIPSNAP3A-shRNA,转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒。结果:重组腺病毒载体经酶切鉴定正确,制备的病毒感染效率高,能显著抑制NIPSNP3A蛋白的表达。结论:干扰HEK293A细胞NIPSNAP3A表达的shRNA重组腺病毒载体构建成功。

摘要：目的设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,构建能有效下调CDCA3蛋白表达的shRNA真核表达载体,研究其对CDCA3表达的影响,以便进一步研究CDCA3的功能。方法根据文献获得CDCA3的siRNA靶序列,依据RNA干扰机制和shRNA靶序列的设计原则,以CDCA3基因为靶基因,合成一对编码shRNA的两条DNA序列,经退火后合成DNA双链,再克隆至shRNA表达载体pSIREN-DNRDsRed质粒中,连接产物转化***109感受态细胞,然后挑取克隆提质粒,进行酶切鉴定和DNA序列测定。将构建成功的载体通过脂质体介导转染导入人胚肾HEK293细胞,采用Western blot法和Realtime RT-PCR,检测特异性shRNA对CDCA3蛋白在mRNA及蛋白表达水平的抑制效果。结果成功构建靶向CDCA3蛋白的特异shRNA的真核表达载体;转染HEK293细胞后,可显著下调CDCA3在细胞内的mRNA水平及蛋白表达水平。结论 CDCA3蛋白的特异shRNA的真核表达载体能显著下调HEK293细胞内的CDCA3蛋白表达。成功构建CDCA3 shRNA表达载体,为进一步研究CDCA3基因的功能提供了实验基础。

摘要：目的 利用酵母双杂交技术从人脑cDNA文库中筛选与人GATA-1相互作用的蛋白质.方法 从人K562细胞中扩增出全长GATA1基因,设计引物将其3段截断体亚克隆入酵母表达载体pDBLeu中,转化至AH109感受态酵母中,利用酵母双杂交技术筛选人脑cDNA文库中与其相互作用的蛋白质,阳性克隆通过回转及免疫共沉淀试验进行验证,利用3xGATA荧光素酶报告基因对相互作用蛋白质进行功能验证.结果 成功构建出酵母诱饵蛋白表达质粒pDBLeu-GATA1（1）,pDBLeu-GATA1（2）,pDBLeu-GATA1（3）,筛到34个阳性克隆,用生物信息学分析及回转验证得到5个与GATA-1相互作用的候选蛋白,通过免疫共沉淀试验进一步验证,获得3个蛋白质能与GATA-1相互作用,分别是ECSIT,EFEMP1和GPS2.荧光素酶试验表明这3个蛋白质均能对GATA1的转录活性产生影响,证实它们之间的相互作用具有影响GATA1转录的功能.结论 应用酵母双杂交技术及免疫共沉淀试验,从人脑cDNA文库中成功获得3个与GATA-1相互作用并对其转录活性具有调节作用的蛋白质,为研究GATA1蛋白质的功能提供了新的线索.

摘要：针对传统的用电负荷数据异常检测方法精度低、提取时间特征困难、特征提取与检测过程分离的问题,提出一种基于深度卷积嵌入LSTM编码器(deep convolution embedded LSTM auto-encoder,DCE-LAE)的电力负荷数据异常检测方法。将长短期记忆网络融入自编码器架构,利用编码器的非线性特征提取能力和长短期记忆网络的时序特征记忆能力提高电力负荷的异常检测精度,将深度卷积层嵌入至该架构中提高感受野,提取更多时间序列特征;将卷积损失和重构损失相结合作为损失函数联合优化,防止卷积嵌入微调对重构空间的扭曲,进一步提高结果的可靠性。实例仿真通过与其它方法进行对比,验证了DCE-LAE的异常检测精度与时序重构能力均优于其它算法。

摘要：为满足激光驾束制导信息场(简称信息场)的外场检测要求,设计了信息场指令值检测系统并应用于实际检测;采用AVR单片机为数据处理核心,主要对处理好的方波信号进行频率判断和周期计算,计算结果由信号收发单元送至计算机指令值检测界面显示。试验结果表明,信息场指令值检测系统检测精度高、处理时间快,完全可应用于外场检测。

摘要：采用四因素三水平正交回归旋转组合设计，试验探讨在地膜覆盖条件下天府18号花生产量与种植密度、施肥量（N、P、K）间的关系，建立产量与各因素的优化数学模型：y=4111．8674＋45．7354X1＋53．2618X2＋57．12／Y3＋40．1058X4—18．9635X1^2—0．0460X2^2－17．5891X3^2－12．3483X4^2－0．0003X1X2＋0．0003X1X4－0．0752X2X4。确立了天府18号花生每公顷获得4025．18kg以上产量的高产栽培优化方案，即种植密度14．142万～15．714万株，46％尿素施用量244．24-292．50kg，12％过磷酸钙施用量415．00～586．00姆，600／0氯化钾施用量123．50～171．38kg。主要因子对产量的贡献大小为密度＞施氮量＞施钾量＞施磷量。