摘要：采用响应面法优化藜麦种子总黄酮的微波辅助提取工艺参数,以山西省忻州市种植的藜麦脱皮种子为原材料,乙醇作为提取溶剂,在单因素实验的基础上,运用Box-Behnken实验设计方案,研究微波功率、微波时间和料液比对总黄酮提取量的影响.结果表明,提取藜麦种子中总黄酮的最佳工艺为:微波时间125 s、微波功率260 W、料液比(g/m L)1∶50,在此条件下提取液中平均总黄酮提取量为6.5 mg/g.经验证,藜麦种子总黄酮提取工艺参数可行,对于开发忻州藜麦有一定意义.

摘要：【目的】通过CRISPR/Cas9技术对甜菜BvCENH3基因进行编辑,建立甜菜高效基因组编辑技术体系。【方法】以BvCENH3为编辑目标,设计双靶标构建基因编辑载体,通过农杆菌侵染甜菜叶柄获得转基因植株,利用二代测序技术检测转基因植株突变情况,通过微滴数字PCR技术筛选低拷贝编辑植株。【结果】获得82株甜菜转基因植株,其中40株被成功编辑,编辑效率为48.78%,靶标1效率优于靶标2。突变类型有单碱基替换(T→G、A→C)、碱基缺失(TC、TCTC缺失)等5种。筛选出23株低拷贝编辑植株,BvCENH3插入拷贝数为1.1~1.9。【结论】成功对甜菜BvCENH3进行定点编辑,获得40株BvCENH3基因突变体。初步创建了甜菜基因组编辑技术体系,为甜菜单倍育种奠定了理论与技术基础。

摘要：【目的】通过CRISPR/Cas9技术对烟草CENH3基因进行编辑,获得CENH3基因发生突变的植株,确定编辑载体的编辑效率与突变类型,建立高效基因组编辑技术体系。【方法】根据CENH3序列设计特异性编辑位点,构建CENH3编辑载体;采用农杆菌介导法转化烟草获得转基因植株,通过测序明确转基因植株的目标基因编辑效率与CENH3突变类型;利用微滴式数字PCR技术筛选低拷贝突变体植株。【结果】随机检测的11株转基因烟草植株,有6株被编辑,编辑效率为54.5%;编辑植株中,靶标1未发生突变,靶标2发生4种突变类型。6株编辑植株均为低拷贝植株,拷贝数为0.3~1.2。【结论】实现了对烟草CENH3的定点编辑,建立了CRISPR/Cas9介导的烟草CENH3基因组编辑体系。