摘要：以豆粕为原料,研究枯草芽孢杆菌固体发酵产纳豆激酶的发酵工艺。以纳豆激酶酶活为指标,采用单因素试验及响应面试验设计优化发酵工艺。确定利用豆粕进行固体发酵产纳豆激酶的最优条件:初始含水量55%、干豆粕装量90 g/250 mL、接种量6%、pH自然为初始培养条件,发酵温度36℃、发酵时间25 h,在此条件下,纳豆激酶酶活可达5421 IU/g,为工业化固体发酵产纳豆激酶提供了理论基础。

摘要：[目的]建立解淀粉芽孢杆菌TF28特异性活菌分子定量技术。[方法]基于TF28特有基因设计qPCR引物,建立菌株特异性qPCR技术;优化PMA处理条件,建立PMA-qPCR定量TF28活菌技术,对其特异性、灵敏性与可靠性进行检测。[结果]建立的qPCR技术对菌株TF28具有特异性。优化的PMA处理条件为:PMA终浓度150μmol/L、暗培养10 min、光照20 min,在此条件下,可封闭10^6cfu/mL以下死菌基因组DNA;建立的PMA-qPCR技术特异性强,灵敏度高,最低检测限10^2cfu/mL;线性关系好,R^2=0. 997;在菌浓度10^3cfu/mL^10^7cfu/mL范围内重复性好,CT值变异系数小于2%,与平板活菌计数比较,差异不显著。[结论]建立的PMA-qPCR技术对TF28具有特异性,能够对菌浓度10^3cfu/mL^10^7cfu/mL活菌进行定量。