摘要：应用两个RNA干扰实验技术网络的RNA设计软件,模拟SD大鼠晚期糖基化终产物受体(RAGE) mRNA的二级结构,设计针对RAGE mRNA417、221和534位点的3对小干扰RNA(siRNA)序列(21nt),再转化为能表达其小发夹结构RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,分别将其克隆于pGCsi-U6/Neo/GFP载体,利用酶切和序列分析鉴定克隆的正确性。将RAGE特异性siRNA表达克隆转染肝星状细胞(HSC)-T6细胞系,以空白及转染非特异性siRNA表达克隆作为对照,分别以实时荧光定量PCR和Western印迹法检测各组HSC-T6细胞RAGE基因和蛋白质的表达。结果显示:成功构建了RAGE特异性siRNA重组表达载体pGCsi-R1、pGCsi-R2、pGCsi-R3和非特异性siRNA重组表达载体pGCsi-C,与对照组相比,转染特异性siRNA重组表达载体的HSC-T6细胞的RAGE mRNA表达受到明显抑制,在0.25～1.0nmol/L范围内,RAGE mRNA下调幅度呈浓度依赖性增加,以1.0nmol/LpGCsi-R1最显著,转染pGCsi-C的HSC-T6细胞的RAGE mRNA表达水平无明显变化。转染pGCsi-R1的HSC-T6细胞24、48和72h表达的RAGE mRNA分别较空白对照组下调(79.65±8.88)%、(78.96±7.94)%和(73.11±6.89)%(F=71.397,61.824,61.98,P均<0.01),在72h范围内,RAGE mRNA下调幅度呈时间依赖性降低。同时,转染pGCsi-R1的HSC-T6细胞50kDa和46kDa的RAGE、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA及蛋白质的表达也明显下调,分别为空白对照组的(43.91±1.18)%(F=386.19,P<0.01)、(36.33±0.78)%(F=386.07,P<0.01)、(57.53±3.25)%(F=20.91,P<0.05)和(58.48±3.08)%(F=56.59,P<0.05)。结果表明:pGCsi-R1表达的特异性siRNA可高效抑制HSC-T6细胞中RAGE基因和蛋白质的表达及肝星状细胞的激活。

摘要：本文阐述了通过区域背景调研,将民间扎染文化渗透到幼儿园一日活动中,从环境创设、保教活动、亲子游戏、创新等方面论证实施效果,有效促进了幼儿在艺术、社会等领域的发展。本文论述了在研究过程中提炼出民间扎染在农村幼儿园的应用途径是切实可行的,并阐述了未来的目标和期望。

摘要：《幼儿园教育指导纲要》在"艺术"领域中提出了"感受与创造并重"的教育观,强调让幼儿视觉和情感获得满足、愉悦的同时,培养其对美的感受能力和艺术创造能力。幼儿园开展陶艺活动是培养感知、体验、创造力的有效途径。陶艺创意活动是幼儿使用陶泥运用捏、揉、搓、垒、拉等方法进行塑造物体的过程。本文分析了学前儿童陶艺创意活动实践与创新的实施策略,并提出了相应的创新途径,为幼儿园陶艺创意活动提供了实践与创新的研究。

摘要：近年,幼儿园本土课程资源受到教师的广泛关注。作为千年古镇——长丰县吴山镇,本土文化资源丰富,包括风景名胜、传统技艺、人文资源、历史文化、民俗艺术等。我园以本土文化课程为切入点,依托园本课程的实践,充分挖掘本土文化资源,引导幼儿了解家乡丰富的文化资源,让幼儿从小感受家乡文化的精髓,传承和弘扬本土文化,激发幼儿热爱家乡的情感。

摘要：应用mfold程序对锤头状核酶(ribozyme,Rz)和大鼠细胞周期蛋白(cyclin)D1基因的二级结构进行分析,设计合成锤头状Rz基因,通过RT-PCR扩增获得大鼠细胞周期蛋白D1目的基因,将Rz基因和细胞周期蛋白D1基因分别克隆入载体pGEM-3Zf(+)中,体外转录Rz基因和靶基因并进行切割实验;将Rz基因与逆转录病毒载体pLXSN重组得到Rz真核表达载体pLXSN-Rz,将其转染入HSC-T6细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,用RT-PCR检测细胞周期蛋白D1基因的表达。结果显示:针对目的基因的832位点设计合成了Rz832,成功获得Rz832基因、细胞周期蛋白D1mRNA的体外转录载体pGEM3Zf-Rz832和pGEM3Zf-cD1,经体外转录出Rz832(105nt)及细胞周期蛋白D1mRNA(1079nt)。体外切割实验证实Rz832能够特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA,产生1014nt和65nt的切割产物,切割效率为80%。所构建的pLXSN-Rz832经酶切电泳、PCR鉴定显示,插入的Rz832序列大小约为57bp,与预期结果相同,经测序证实Rz832序列正确。转染pLXSN-Rz832的肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSCs)细胞周期蛋白D1mRNA的表达受到明显抑制,仅为对照组的42.22%(t=-193.443,P<0.01),结果表明:Rz832能够在体外特异性切割细胞周期蛋白D1mRNA、并在HSC-T6细胞内有效抑制细胞周期蛋白D1基因的表达。

摘要：在全球化的浪潮中,各国文化的交流与碰撞日益频繁,民间传统工艺作为一种独特的文化现象,其保护与传承显得尤为重要。扎染,作为我国传统的民间工艺之一,以其独特的艺术魅力和深厚的文化底蕴,吸引了无数人的目光。然而,随着现代化进程的加快,这种传统工艺的传承面临着严峻的挑战。如何在新的历史条件下,将扎染这一传统工艺引入幼儿园教育,使其在孩子们的心中扎根,成为了我们需要深入研究的问题。扎染作为一种传统工艺,其保护和传承需要付出持续的努力。