摘要：根据本室已获得的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6家族成员cDNA序列片段，设计一对特异性引物．以上述蚊株总RNA为模板，分别进行5’-cDNA末端快速扩增(5’-RACE)和3’-cDNA末端快速扩增(3’-RACE)，所获得的产物经1．2％琼脂糖凝肢电薄，显示：5’-RACE产物达I.5kb，3’-RACE产物达500bp，扣陈两者重叠部分的已知cDNA片段(250bp)，则该CYP6家族成员生长cDNA长度达1．75kb，与其它昆虫中已知的CYP6家旅全长cDNA长度相似；然后再分别切胶回收，并以此(RACE产物)为模板，用上述双引物进行PCR鉴定，结果显示2个RACE产物均包含有已知的250bp cDNA片段，提示所得的RACE产物为该CYP6家族成员生长cDNA。

摘要：根据家蝇CYP6A1、CYP6D1以及致倦库蚊CYP6E1的保守区氨基酸序列设计一组简并引物,采用RT-PCR的方法,从白纹伊蚊四龄期活体幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T-A克隆法,将获得的基因片段克隆人pGEM-T easy载体。经限制性内切酶酶切和PCR鉴定证明重组成功。将筛选的阳性克隆经序列测定及同源性分析,表明共获得CYP6家族中9个的新cDNA序列。为进一步研究细胞色素P450的多样性及其与抗药性形成的分子机制打下基础。

摘要：目的　获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株ＣＹＰ６ 基因家族中某个成员的一个基因片段。方法　根据家蝇ＣＹＰ６Ａ１、ＣＹＰ６Ｄ１ 以及致倦库蚊ＣＹＰ６Ｅ１ 同源区氨基酸序列，设计１ 对简并引物，进行ＰＣＲ，获得一与设计的细胞色素Ｐ４５０ 基因片段大小相符合的基因片段。将该片段与ｐＵＣ１９ 质粒重组，并克隆至ＪＭ１０９ 大肠杆菌中，经筛选后测序；将推导的氨基酸序列进行同源性分析，并用ＰＣ／ＧＥＮＥ软件绘制系统树。结果　获得了１ 条长２４８ｂｐ 的核酸序列；所得序列与昆虫ＣＹＰ６ 家族的同源性在３４－２ ％ ～４４－３％ 之间，而与ＣＹＰ４ 家族同源性较低，与ＣＹＰ４Ｃ１ 、ＣＹＰ４Ｄ１、ＣＹＰ４Ｄ２ 同源性分别为２２－１％ 、２９－５ ％ 和２７－６ ％ ；所绘制的系统树显示出与同源性分析相一致的结果。结论　该序列为ＣＹＰ６ 家族中某一成员的基因片段。

摘要：目的】获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6基因家族中的一个cDNA片段。【方法】根据家蝇CYP6A1、CYP6D1以及致倦库蚊CYP6E同源区氨基酸序列,设计1对简并引物,进行反转录PCR,获得一大小与设计的细胞色素P450基因片段相符合的cDNA片段。将该片断与pUC19质粒重组,并克隆至JM109大肠杆菌中,经筛选后测序;将推导的氨基酸序列进行同源性分析,并用PC/GENE软件绘制系统树。【结果】获得了1条长240bp的核酸序列;所得序列与昆虫CYP6家族的同源性在36.3%～46.8%之间,但CYP6D1除外,其同源性为29.1%;而与CYP4家族同源性较低,与CYP4C1、CYP4D1、CYP4D2同源性分别为333%、329%和299%;与哺乳动物CYP3A亚家族同源性亦较高;所绘制的系统树显示出与同源性分析相一致的结果。