摘要：目的:分离、克隆人类疱疹病毒8型(HHV-8)编码的病毒干扰素调节因子(virusinterferonregulatoryfactor,vIRF)基因K9,并将其导入真核细胞中进行表达。方法:根据GenBank登记的K9基因核苷酸序列设计一对PCR引物,其5′端分别引入HindⅢ和BamHⅠ酶切位点。以原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增K9基因,经双酶切后克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pK9。为了便于蛋白检测,再设计第二对引物,上游引物不变,在下游引物5′端引入了Flag序列。以质粒pK9为模板再次PCR,扩增K9-Flag基因,并把K9-Flag序列克隆入pcDNA3.1(+)中,得到重组质粒pK9F。重组质粒经酶切鉴定,核酸序列测定和分析后瞬时转染NIH3T3细胞,用RT-PCR、Westernblot分别从核酸和蛋白水平检测K9基因的表达情况。结果:PCR分离、克隆的K9-Flag序列全长1380bp,核酸序列分析显示克隆的K9基因与GenBank中己经登记的K9基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确;RT-PCR和Westernblot都在K9预期位置检测到特异性条带。结论:HHV-8K9基因在NIH3T3细胞中获得了正确表达。

摘要：目的:分离克隆卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)编码IL-6基因(vIL-6),并导入NIH3T3细胞中进行真核表达。方法:根据KSHV编码IL-6基因核苷酸序列设计一对引物,在引物的5′端分别引入BamHⅠ、HindⅢ酶切位点,以原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增vIL-6基因,PCR产物经双酶切克隆进真核载体pcDNA3.1(+)。进一步在原有的下游引物5′端加上一段flag序列,以经过序列测定正确的重组质粒为模板,PCR扩增vIL-6-flag融合基因,构建含vIL-6-flag的重组质粒。将该质粒转染NIH3T3细胞,经G418筛选获细胞抗性克隆。最后用抗flagM2单克隆抗体进行Westernblot检测vIL-6在NIH3T3细胞中的表达。结果:获得vIL-6-flag融合基因,全长671bp,其中vIL-6基因核苷酸序列与GenBank中所登记的KSHVvIL-6基因呈现100%同源性。Westernblot结果显示,在约25ku位置有目的条带,与预期的重组vIL-6-flag融合蛋白大小一致。结论:KSHVvIL-6编码基因在NIH3T3细胞中初步获得表达。

摘要：一、目前企业薪酬表现问题分析第一点就是薪酬功能定位问题,这一点不论在国有还是民营企业都表现的比较明显,实质上是企业对人的价值的认识问题,把物质报酬与非物质报酬对立起来。从人的需求层次来看,当人获得了生存的基本满足之后,其价值实现更多的在于发展机会以及能力实现问题,企业需要通过非物质报信的激励手段来激发员工的潜力以转化为实际工作业绩。在薪酬功能定位上出现问题就可能导致外在的不公平,不仅企业无法吸引人才,而且可能导致内部关键人才离去。

摘要：[目的]探讨微信平台在血液透析(MHD)病人院外延续性护理中的应用效果。[方法]将103例MHD病人随机分为干预组52例和对照组51例,两组病人在院内均接受MHD病人常规治疗与护理,干预前收集资料、评估,制订计划,完成基线调查。院外通过微信平台对干预组进行干预,分别于干预前、干预3个月末、干预6个月末采用自行设计的疾病知识问卷、健康相关行为量表及液体依从性进行效果评价。[结果]干预3个月末及6个月末,干预组病人疾病知识得分、健康行为得分及液体依从性明显优于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。[结论]微信平台应用于MHD病人延续性护理中,可以明显提高病人的疾病知识水平,帮助病人建立健康相关行为,改善液体依从性,最终提高病人生活质量。