摘要：当前XR技术已经趋于成熟,并在电影、直播等领域中发挥重要作用。探索扩展现实技术(XR)技术结合钦州市坭兴陶博物馆创作媒体装置艺术的可能性,通过扩展现实技术打造坭兴陶博物馆的数字化互动空间,改变坭兴陶博物馆展示内容单一的现状并分析其可行性。采用文献研究和案例分析,参考国内外成功案例。以扩展现实技术为基础设计媒体装置,结合坭兴陶文化的特点,打造能够增加互动体验的空间。

摘要：目的:观察Galectin-3表达与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为肿瘤基因治疗的方法。方法:实验于2005-06/2006-12在南方医院消化研究所完成。从PubMed的序列号NM-002306中按照引物设计软件设计并化学合成4条Galectin-3小干扰片断,从中选出有效的干扰片断,并顺势转染大肠癌细胞系LOVO(为Galectin-3siRNA组),用未转染细胞做为正常对照,以转染阴性干扰片断作为空白对照,免疫印记法验证干扰结果,MTT方法观察干扰后24,48和72h各组细胞增殖吸光度(A值),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:①用顺势转染的方法成功转染了Gal-3siRNA片断,转染后72h收集细胞并提取细胞浆蛋白,免疫印记法验证结果显示Galectin-3siRNA组灰度值(55.790)与正常对照(97.234)及空白对照的灰度值(90.459)相比,galectin-3表达明显减弱(P<0.05)。②细胞增殖情况:干扰后24,48和72hGalectin-3siRNA组细胞继续生长,但细胞生长减慢,A值低于正常对照和空白对照(24h:1.018±0.002,1.478±0.185,1.169±0.005;48h:2.049±0.008,2.635±0.003,2.532±0.009;72h:2.512±0.506,3.213±0.006,3.060±0.002;P均=0.000)。③细胞凋亡率:各组中凋亡中晚期均多于早期,Galectin-3siRNA组高于正常对照和空白对照[早期:(15.900±2.508)%,(3.813±1.305)%,(5.780±1.56)%;中晚期:(19.750±0.780)%,(5.050±0.120)%,(7.667±0.145)%;P均=0.000]。结论:成功转染并抑制了galectin-3在大肠癌细胞系lovo中的表达,干扰后细胞增殖减慢,凋亡增加。

摘要：机器人在临床医学领域的应用正逐步改变传统的诊疗模式,在消化内镜领域,机器人操作的出现有望在普及内镜检查、完善质控、减轻医师负担等方面发挥重要作用。本文就不同设计类型的消化内镜机器人的研发现状进行介绍。

摘要：目的:构建galectin-3shRNA真核表达载体,观察该基因的抑制对大肠癌细胞系lovo细胞增殖率的影响.方法:以未转染lovo细胞作为阳性对照组,转染空质粒的lovo细胞作为阴性对照组,将针对人galectin-3基因的不同部位设计的长度约140bp的shRNA,插入到真核表达载体PRNAT-U6.1并转染人大肠癌细胞lovo,双酶切鉴定重组载体,免疫荧光检测转染效果,RT-PCR和Western-Blot检测其对该基因mRNA和蛋白水平的抑制,MTT测定干扰后对lovo细胞增殖率的影响.结果:双酶切出一条约120bp的DNA片断,与插入片断长度相符.PRNAT-U6.1/Galectin-3shRNA表达载体顺势转染lovo细胞72h后检测转染效率及Galectin-3在mRNA和蛋白水平的表达情况,免疫荧光检测转染效率为62%.转染PRNAT-U6.1/Galectin-3shRNA的lovo细胞Galectin-3的表达在mRNA和蛋白水平均明显下降,各组间比较F=2.214,148.566,P=0.000,0.000,阴性组和阳性对照组相比,P=0.448,0.263.干扰后细胞继续生长,与干扰前相比,生长明显减慢,F=20.830,P=0.000,组间比较F=149.710,P=0.000,shRNA干扰组与阴性组和阳性组比较,P=0.000,0.000.结论:成功构建Galectin-3shRNA表达载体,干扰后Galectin-3在mRNA和蛋白水平的表达明显降低,Galectin-3表达的抑制可能会导致大肠癌细胞lovo增殖率的降低.

摘要：目的以破伤风毒素C片段(TETC)基因为例,探讨区段基因拼接方法。方法根据已知的TETC基因序列(GenBank登记号M12739,367-1719),结合乳链菌氨基酸密码子的基因编码情况,设计适于在乳链菌内表达的TETC基因序列,为进一步克隆,根据同义突变的原理消除序列中的EcoRI和KpnI的酶切位点,在TETC基因的5′端加上SalI酶切位点,3′端加上XhoI和HindⅢ酶切位点,序列全长1383bp。将其中1380bp的片段使用DNAstar6.0设计为68条长40bp的寡核苷酸TETC_1-TETC_68,设计TETC_69作为下游引物。分3个区段分别拼接TETC_1-24、TETC_23-46、TETC_45-68,随后分别以TETC_1、TETC_69为上下游引物,进行TETC全长基因的拼接,将获得的TETC基因经SalI和HindⅢ双酶切后连接到经相同双酶切的p BluescriptⅡSK(+),得到的阳性克隆经测序鉴定。结果分别拼接出大小约500bp的TETC_1-24、TETC_23-46、TETC_45-68,等浓度的3个区段混合后,拼接出了全长为1383bpTETC基因,目的基因连接到载体后测序与设计的TETC基因完全一致。结论区段基因拼接法采用分段拼接的方法先拼接出全长基因的组成部分,随后进行全长基因拼接,更适合长基因片段的体外拼接。

摘要：目的建立一种快速准确的分子生物学方法检测腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌,以替代繁琐费时的培养鉴定方法。方法应用针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌染色体上yst基因而设计的特异引物和探针进行实时定量聚合酶链反应(PCR,探针法),检测致病性(7种血清型)和非致病性(5种)小肠结肠炎耶尔森菌、耶尔森菌属内的其他菌种(8种)及其他肠道细菌(8种)。此外,实时定量PCR检测经过培养方法鉴定的腹泻粪便200例,并比较两种方法的吻合度。结果引物和探针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌100％特异,与其他细菌无交叉反应。在纯培养物和粪便中,最低检测浓度分别为102菌落形成单位(CFU)／ml和103CFU／g。在200例样本中,培养鉴定方法和实时定量PCR检出同样18例阳性样本,吻合度为100％。结论实时定量PCR反应对致病性小肠结肠炎耶尔森菌高度特异且与培养鉴定方法有很好的吻合性又方便快捷,可应用于临床检测。

摘要：目的克隆migfilin-N末端基因并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化基因表达产物并进行多克隆抗体制备,为研究migfilin与大肠癌的关系奠定基础。方法根据人migfilin全长cDNA系列,设计PCR引物,以人大肠癌cDNA文库为模板克隆migfilin-N末端基因,将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,经EcoRI/XhoI双酶切鉴定后,进行DNA序列测定。GST-migfilin-N融合蛋白在硫代半乳糖苷诱导下在大肠杆菌BL21中得到表达。利用谷胱甘肽亲和层析纯化融合蛋白,用纯化的GST-migfilin-N融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体。并用纯化的抗migfilin多克隆抗体在不同的细胞株中用Western blotting检测migfilin的表达。结果成功克隆了migfilin-N端基因片段,表达并纯化了GST-migfilin-N融合蛋白,制备了migfilin特异性抗体。Western blotting检测migfilin在不同细胞株中的表达,结果显示migfilin在肺癌及大肠癌细胞株中高表达。结论migfilin特异性抗体制备成功,为深入探讨migfilin在大肠癌中的作用奠定了基础。

摘要：目的探寻一种简单、快速、灵敏的检测艰难梭菌的方法。方法 以艰难梭菌毒素A和毒素B基因3’末端高度保守重复区分别设计一对引物,进行PCR反应,同时在同一体系相同反应条件下使用相同引物分别以大肠杆菌和乳杆菌DNA为模板进行扩增,比较二者结果。结果从艰难梭菌成功克隆了毒素A基因3’端重复区域960bp的基因片段及毒素B基因3’端重复区域1851bp的基因片段,不同来源的菌株出现了相同的2条电泳带,并通过测序鉴定;而对照的大肠杆菌和乳杆菌株无特异电泳带出现。结论从艰难梭菌毒素人毒素B基因3’末端重复区域克隆的基因片段具有保守性,可以作为基因探针在临床上进行艰难梭菌检测,该方法简便、灵敏,可直接用粪便标本进行检测。此外,这些基因编码的多肽具有较高的疏水性井存在着膜受体结合区域,可以此为基础进行基因工程蛋白质疫苗的研究。

摘要：目的构建galectin-1基因特异小分子干扰RNA(siRNAs)真核干扰载体,并获得干扰载体稳定转染的LST-R1细胞系。方法设计2对galectin-1 mRNA(GenBank:NM002305)特异性siRNAs,两端分别带有BamHⅠ/HindⅢ酶切位点和一个9nt的发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pSUPER-puro中,构建galectin-1 siRNA表达载体,以EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及测序验证重组载体的正确性。将重组载体与pcDNA6/TR共转染LST-R1细胞,以嘌呤霉素(0.8μg/ml)进行阳性克隆筛选。四环素(4μg/ml)诱导48h后,RT-PCR检测galectin-1 mRNA表达水平,Western blotting和细胞免疫化学方法检测galectin-1蛋白质水平的变化。结果测序表明galectin-1 siRNA真核表达载体p-shRNA1和p-shRNA2干扰序列与读码框相符。p-shNRA1和p-shRNA2与pcDNA6/TR共转染LST-R1细胞,获得稳定的重组质粒转染细胞p-shRNA1-LST和p-shRNA2-LST。RT-PCR显示,galectin-1 mR-NA在LST-R1细胞、p-shRNA1-LST细胞、p-shRNA2-LST细胞以及p-LST细胞中的表达量分别为0.616、0.298、0.373和0.641,以p-shRNA1-LST的干扰效果最好。Western blotting结果显示,在LST-R1、p-shRNA1-LST、p-shRNA2-LST和p-LST细胞中galectin-1的表达量分别为1.00、0.07、0.38和0.97,以p-shRNA1-LST干扰效果最好,与免疫细胞化学的结果一致。结论成功构建了galectin-1真核干扰载体,RNAi载体转染LST-R1细胞系的建立为进一步研究galectin-1在大肠侧向扩散型肿瘤中的作用奠定了实验基础。

摘要：危险与可操作性(HAZOP)分析是一种用于辩识设计缺陷、工艺过程危害及操作性问题的结构化分析方法,是目前国内外应用最广泛的安全分析法之一。通过该分析方法,对危化品汽车装卸站的操作步骤进行针对性分析,可以最大程度的识别出整个装卸过程中潜在的安全风险,并制定出行之有效的安全措施加以防范,最终达到安全装卸的目的,最大可能的减少安全事故的发生。