摘要：为建立一种禽多杀性巴氏杆菌的PCR检测方法,本研究根据GenBank中已发表的禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因序列,设计与合成了一对特异性引物,建立了一种基于禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因的PCR检测方法,并优化了反应条件,检测了该方法的特异性和敏感性。结果显示,该方法可成功扩增出禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因片段,而鸡致病性大肠杆菌、鸡金黄色葡萄球菌和鸡白痢沙门菌均未扩增出相应片段。敏感性试验表明该方法可检测最低浓度为1pg/μL的禽多杀性巴氏杆菌基因组DNA。

摘要：[目的]本文旨在研究一种新型的金黄色葡萄球菌选择性增菌培养基(SSA)。[方法]试验模拟即食果蔬加工环境的低热杀菌环境探索金黄色葡萄球菌亚致死情况,并以此为条件选出最优的基础培养基。挑选3种促进剂、6种抑制剂进行单因素筛选,从中选出4种因素进行响应面设计,得到最优配方组合。随后对优化得到的配方进行重复性、特异性、亚致死恢复验证试验与人工污染即食果蔬培养试验。[结果]优选出的最佳方案为以Luria-Bertani(LB)培养基为基础,向其中加入葡萄糖、丙酮酸钠、萘啶酮酸和苯乙醇分别至1.73 g·L^(-1)、12.52 g·L^(-1)、3.82 mg·L^(-1)和1.60 mL·L^(-1)。热损伤金黄色葡萄球菌在SSA中培养120 min后的修复率达到100%,显著优于LB培养基(89.2%)与75 g·L^(-1)氯化钠肉汤的修复率(51.2%),金黄色葡萄球菌在SSA中培养的终浓度高于LB培养基,生长速度大于75 g·L^(-1)氯化钠肉汤,而非金黄色葡萄球菌在SSA中的生长被抑制。[结论]SSA培养基能够有效抑制非目标菌的生长,同时促进金黄色葡萄球菌的生长,SSA培养基与分子检测法结合可以提高检测准确性,并在10 h内得到检测结果。