摘要：目的大面积深度烧伤治疗的半数致死面积(LA50)已达98%,但由于伤面切除植皮后无汗液分泌,使患者的生活质量显著下降。目前,由于烧伤治疗技术已趋成熟,存活者日益增多,因而汗腺再生的问题必须解决,而通过干细胞移植诱导再生汗腺是其中的重要方法之一。方法分离培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)和人汗腺细胞(SGCs)并进行鉴定。通过共培养方式促进骨髓间充质干细胞向汗腺细胞分化。将具有汗腺表型的干细胞局部移植于裸鼠烫伤脚掌,观察汗腺组织再生修复情况,结合碘-淀粉发汗试验检测汗腺功能以判定治疗效果。在动物实验初步证明转化的汗腺细胞能发挥修复汗腺功能后,选择2例烧伤自愿患者。1例患者双上臂背侧均有相似的烧伤后遗留的瘢痕,经发汗腺试验证明无汗液分泌。抽取其骨髓并切取小块正常皮肤分离培养骨髓间充质干细胞和汗腺细胞进行共培养,诱导骨髓间充质干细胞获得汗腺细胞表型,通过自行设计的方案将该细胞种植于右侧切除瘢痕处。创面愈合后治疗侧行发汗试验、汗液成分分析以及组织学检查。另1例为颏颈挛缩、瘢痕切除解除挛缩的患者,在其1/3的创面上种植诱导的汗腺细胞,2个月后进行发汗试验。结果通过共培养方式培养的骨髓间充质干细胞表达汗腺细胞特异性标志,可获得汗腺细胞表型。发汗试验和形态学观察证实将具有汗腺细胞表型的干细胞移植于裸鼠脚掌的创面后,能显著促进受损汗腺的修复与再生。人体移植试验表明,种植诱导的汗腺细胞后患者创面愈合部位呈现出汗功能,对照部位发汗试验阴性,形态学检测显示移植汗腺的真皮浅层有大量癌胚抗原(CEA)阳性细胞,结构类似正常汗腺组织。汗液成分分析结果显示移植处收集的汗液与正常皮肤处收集的汗液具有类似的pH值、渗透压和化学组分。第2例创面移植汗腺细胞后发汗试验也呈阳性。结论干细胞能够在体外成功诱导为汗腺细胞,移植后在创面能形成具有功能的汗腺。但在大面积烧伤患者早期切除焦痂后进行汗腺修复能否获此功效,尚待进一步研究。

摘要：目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤模型创面愈合中血管形成与血流改变的特点。方法:Wistar大鼠48只,随机分为A、B两组,A组(n=42):为组织病理观察组,根据实验设计又分伤后即刻、1天、3天、7天、14天及21天及正常对照组,每组6只;B组(n=6):为血流量检测组。在实验大鼠背部制作深Ⅱ度烫伤模型,A组大鼠在各时间点活杀取材,进行病理和免疫组化检测;B组大鼠连续检测背部同一部位正常皮肤及伤后各时间点的创面血流量。结果:烫伤大鼠伤后3～7天,肉芽组织内出现单个的不成腔的血管内皮细胞,数目随肉芽组织的增多而逐渐增加,后逐渐形成管腔;伤后14天,肉芽组织内有腔毛细血管进一步增多,已出现结构较完整的成熟小血管;伤后21天血管形态和数量已接近正常皮肤。深Ⅱ度烫伤大鼠伤后即刻,皮肤血流量锐减为正常皮肤血流量的51%;伤后3天时,创面血流量仅达正常血流量的68%;至伤后14天,创面血流量升到正常值的88%;14天后逐渐正常。结论:在皮肤深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中,随着肉芽组织内内皮细胞数量和结构的变化,创面的血流量不断增加,前者的变化是后者变化的基础。

摘要：为了评价由胶原、聚乙烯醇以及上皮细胞生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）组成的三种新型复合生物驻极体材料对创伤修复的作用而设计本项研究。方法是将３０只家兔背部的１８０个创面分成五组，分别采用三种复合生物驻极体材料、磺胺嘧啶银（ＳＤ－Ａｇ）及生理盐水治疗，并用肉芽组织填充率、再上皮化速率及组织病理学指标评价治疗效果。结果表明：经三种复合生物驻极体治疗的创面肉芽组织填充率及创面再上皮化速率都较生理盐水对照组与ＳＤ－Ａｇ组明显增加，组织学检查也证实经复合生物驻极体治疗的创面，成纤维细胞和毛细血管胚芽数均较对照组明显增多，且再上皮化明显。复合生物驻极体显著的促修复作用可能来自两方面：一是驻极体本身作为创面电位平衡的调节剂，能起到刺激兴奋传递与诱导有关修复组织转入激活状态的作用；二是驻极体中复合的ＥＧＦ本身也能直接刺激再上皮化过程。

摘要：血管内皮细胞生长因子具有维持血管正常功能,促进血管内皮细胞增殖,提高血管通透性,改变细胞外基质的等作用,与创伤组织的修复和血管生成密切相关。为此,本研究利用RT-PCR技术钓取VEGF基因的cDNA序列。具体方法是,用常规方法从胎肝组织中提取纯度高RNA后进行甲醛变性凝胶电泳;电泳结束后,在紫外灯下可看见凝胶上有285和185两条清晰的电泳带,其亮度之比约为2:1,这显示:获得的RNA较完整,没有降解。取适量胎肝细胞总RNA,遵循PolyATtraet(mRNA Isolation System的操作要求分离纯化mRNA后,以01190(dT)为引物,遵循。DNASynthesis System操作步骤合成dseDNA。根据文献报道的VEGF基因序列,用Goldkey软件设计的PCR反应体系中的上下游引物,它们分别为:上游引物为:5’一CGGCTAGCGC-CTCCGAAACCA TGAACT-3’,下游引物为:5’一GGTAC-CTCACCGCCTCGGCTTGTCACATCT一3’,两条引物5夕端下画线碱基序列分别为Nhel和Kpnl的酶切位点。