摘要：背景:研究已证实,磷酸肌醇3激酶特异性阻滞剂LY294002在体外具有剂量依赖性抑制细胞活性的作用,可以用于诱导肿瘤细胞凋亡,但LY294002对正常免疫系统的影响尚不清楚。目的:观察抗肿瘤药物LY294002对C57BL/6小鼠体内调节性T细胞的影响。设计、时间及地点:以调节性T细胞比例为观察对象,分组对比实验,于2008-08/12在广州南方医科大学珠江医院移植免疫研究所完成。材料:14只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分成实验组与对照组,每组7只。LY294002购自广州英韦创津公司。方法:实验组腹腔注射LY294002溶液200μL(0.1mg),对照组给予等体积PBS。10h后后眼眶静脉从采血,并分离脾脏、胸腺,制备单细胞悬液,流式细胞术检测小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中的CD4+CD25highT细胞。主要观察指标:小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中CD4+CD25highT细胞的比例。结果:实验组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.787±0.036)%,(0.921±0.063)%,(1.230±0.131)%,对照组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.640±0.030)%,(0.639±0.046)%,(0.857±0.077)%,实验组和对照组比较差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:腹腔注射LY294002可提升小鼠体内调节性T细胞的比例,提示其有可能会抑制机体免疫反应,从而不利于治疗。

摘要：目的促进中轴型脊柱关节炎患者自我管理疼痛。方法将中轴型脊柱关节炎住院患者按照住院时间段分组,对照组(41例)接受常规治疗护理,干预组(45例)实施基于Delphi法设计的疼痛自我管理方案。干预3个月后,测量两组疼痛自我管理阶段、疼痛强度及其影响与疼痛自我效能。结果干预后干预组疼痛自我管理阶段分布显著变化,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论实施疼痛自我管理方案可改变患者自我管理疼痛的意愿及相关行为,有助于改善其疼痛强度和疼痛自我效能。

摘要：背景:预输注供者凋亡细胞能够诱导受者体内产生针对供者抗原发生的特异性免疫耐受,但其具体途径尚不清楚。目的:观察供体凋亡淋巴细胞输注后受体外周血细胞因子的变化。设计、时间及地点:细胞观察性实验,于2007-11/2008-05在南方医科大学附属珠江医院移植免疫实验室完成。材料:供体C57BL雄性小鼠14只,8～10周龄,受体Balb/c雄性小鼠50只,6～8周龄。方法:分离供体小鼠脾脏细胞,放置于紫外线灯距离20cm处的摇床上照射1h,紫外线诱导C57BL小鼠脾脏细胞凋亡。将受体Balb/c小鼠随机分为凋亡细胞组和活细胞组,分别将107个供体C57小鼠脾脏凋亡细胞、活细胞经尾静脉输注于受体小鼠。主要观察指标:输注后0,1,3,6,12h经心脏采血,Luminex技术液态芯片法检测外周血白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素5、白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ、肿瘤坏死因子变化。结果:只检测到白细胞介素6、白细胞介素10、白细胞介素12、粒细胞-巨细胞集落刺激因子、干扰素γ5种细胞因子,其他细胞因子未测出。经紫外线诱导后小鼠脾脏细胞凋亡率达到93.86%。与0h相比,外周血中干扰素γ和白细胞介素10分别在输注活细胞后6h和3,6h明显升高,其他细胞因子无明显变化。与0h相比,输注凋亡细胞1,3,6,12h后,外周血中各细胞因子无明显变化。活细胞组输注后1h白细胞介素6和输注后3,6h白细胞介素10浓度高于凋亡细胞组,其他细胞因子差异不显著。结论:同种异源供者凋亡淋巴细胞输注对外周血细胞因子浓度无变化,提示其对受体外周免疫功能可能无明显影响,其诱导产生的免疫耐受可能主要在局部发挥作用。

摘要：背景:器官移植受者在受到同种抗原人类白细胞抗原(HLA)免疫致敏后,外周血中容易产生群体反应性抗体,如何提高致敏受者肾移植的成功率和移植物长期存活率值得深入研究。目的:通过检测肾移植受者的HLA-IgG抗体水平及其特异性,评估受者体液免疫致敏状态,并观察HLA交叉反应组配型可接受性错配情况与移植肾存活率的关系。设计:临床观察。单位:南方医科大学附属珠江医院。对象:选择1998-01/2005-12在南方医科大学附属珠江医院器官移植科接受肾移植1297例患者,男824例,女473例,平均(42±16)岁,其中HLA-IgG抗体阳性受者165例,阴性受者1132例。初次肾移植受者1217例,2次移植77例,3次移植2例,4次移植1例。所有患者在接受本实验相关检测及治疗前均签署知情同意书,本实验经过医院伦理委员会批准许可。试剂:莱姆德抗原板和混合抗原板购自美国One Lambda公司。HLA-Ⅰ类单克隆抗体湿板和HLA-Ⅱ类DNA分型试剂购自美国One Lambda公司;Taq多聚酶购自美国PE公司;DNA抽提试剂购自德国QIAGEN公司。抗人C4d多克隆抗体和显色底物DAB购自奥地利Biomedica公司。方法:①通过酶联免疫吸附试验筛查受者术前血清中的HLA-IgG抗体,对阳性血清进一步用抗原板(LAT1240和LAT1HDS)检测抗体阳性率及其特异性,采用序列特异性引物聚合酶链反应技术进行HLA基因分型。②对40例Scr升高的受者进行抗HLA抗体检测和移植肾穿刺活检,并通过免疫组织化学染色观察肾小管周围毛细血管壁上C4d的沉积。③移植受者术后1,3,5年移植肾存活率及性别、移植与抗体阳性率的关系,并分析不同HLA交叉反应组错配数受者移植肾存活率的差别。主要观察指标:①肾移植患者手术前后HLA-IgG抗体阳性率及HLA分型。②移植肾活检组织中肾小管周围毛细血管壁上C4d的沉积特征。③移植肾存活率差别。结果:患者1297例均进入结果分析。①HLA-IgG抗体阴性受者1132例,阳性受者165例,I类HLA-IgG抗体阳性受者126例,II类HLA-IgG抗体阳性受者90例,51例受者同时存在I类和II类HLA-IgG抗体,抗体阳性率>50%的高致敏受者94例。②40例移植肾穿刺活检标本中,13例患者观察到肾小管周围毛细血管壁上存在C4d的沉积,27例未见C4d沉积;13例C4d阳性受者中10例外周循环中抗HLA抗体阳性。③抗体阳性受者移植物功能延迟恢复的发生率显著高于阴性受者(P0.05)。女性受者中抗体阳性率明显高于男性受者(P<0.01),再次移植受者中抗体阳性率显著高于初次移植受者(P<0.01);随着HLA交叉反应组错配数的增加,移植肾存活率呈下降趋势,0错配受者的1,3,5年移植肾存活率分别为97%,94%和92%,2错配受者1,3,5年移植肾存活率分别为91%,82%和77%,3错配受者较0错配受者下降更为明显,分别为9%,15%和24%。结论:肾小管周围毛细血管壁上C4d的沉积可作为抗体介导体液性排斥反应的客观指标,供受者间良好的HLA配型能显著降低排斥反应发生率和改善移植物存活。

摘要：背景:群体反应性抗体可介导超急性排斥反应,导致群体反应性抗体阳性致敏患者肾移植成功率和移植物存活率均低于非致敏患者。目的:根据人类白细胞抗原交叉反应组配型标准为群体反应性抗体阳性致敏肾移植患者选配合适供者,观察移植后急性排斥反应发生率及移植肾存活情况。设计:病例观察。单位:南方医科大学珠江医院。对象:选择1997-01/2003-12在南方医科大学珠江医院器官移植科施行肾移植136例群体反应性抗体阳性的致敏受者,男41例,女95例,年龄(45±9)岁。初次肾移植115例,2次移植18例,3次移植2例,4次移植1例。所有受试对象均对检测项目知情同意,实验经过医院伦理委员会批准。LAT莱姆德抗原板和LAT-Mix混合抗原板购自美国OneLambda公司。SMT72R抗人类白细胞抗原-Ⅰ类单克隆抗体湿板和人类白细胞抗原-Ⅱ类DNA分型试剂购自美国OneLambda公司。方法:以酶联免疫吸附试验动态监测患者手术前后IgG型抗人类白细胞抗原抗体水平及其特异性。应用抗人类白细胞抗原-Ⅰ类单克隆抗体湿板进行供、受者人类白细胞抗原-Ⅰ类抗原分型,微量序列特异性引物法进行供、受者人类白细胞抗原-Ⅱ类基因分型,根据美国器官共享网制定的人类白细胞抗原交叉反应组配型标准和Ⅱ类抗原可接受性错配原则进行供、受者选配。评估抗原交叉反应组配型原则下患者移植术后急性排斥反应发生率及移植肾1,3,5年存活率进行评价。主要观察指标:①致敏患者手术前后抗人类白细胞抗原抗体水平及特异性。②供受者人类白细胞抗原组织配型。③肾移植术后急性排斥反应发生率及移植肾存活率。结果:纳入136例PRA阳性致敏患者均进入结果分析,无脱落者。①致敏患者中104例存在抗人类白细胞抗原-Ⅰ类IgG抗体,76例存在抗人类白细胞抗原-Ⅱ类IgG抗体,44例同时存在抗人类白细胞抗原-Ⅰ类和Ⅱ类IgG抗体。②按照传统人类白细胞抗原配型标准供、受者人类白细胞抗原0,1,2,3,4个抗原错配者分别为7,26,47,39和17例;按照人类白细胞抗原交叉反应组配型标准供、受者人类白细胞抗原抗原0,1,2,3,4个抗原错配者分别为31,53,36,16和0例。③按人类白细胞抗原交叉反应组配型原则,人类白细胞抗原无错配者的急性排斥反应发生率明显低于2个和3个抗原错配者,差异有统计学意义(P<0.05),人类白细胞抗原无错配者移植肾1,3,5年存活率高于2个和3个抗原错配者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①人类白细胞抗原交叉反应组配型标准能提高肾移植供受者的相配率。②良好的人类白细胞抗原配型可降低肾移植术后急性排斥反应的发生率,提高移植肾的存活率。