摘要：由于受到各种因素的影响,各级医院皮肤科医师对银屑病防治新知识的理解和接受情况可能会有所不同,这将直接影响银屑病的综合防治效果。为了了解各级医院皮肤科医师对银屑病防治基本知识,特别是对银屑病可能的激发因素的掌握情况与开展健康教育工作的态度,我们专门设计了一份面对皮肤科医师的问卷,以从中获取有关信息,为制定今后银屑病防治工作计划和策略提供依据。

摘要：近年来临床医学和流行病学研究结果显示,银屑病患者对自身疾病的态度、知识和行为对疾病的过程与严重程度有明显的影响,医务人员通过了解患者对其自身疾病的认知水平、态度和行为并对其进行有针对性的教育和指导,将有助于提高银屑病防治效果和患者的生活质量 [1-5]。为了了解我国银屑病患者对自身疾病的认知、态度和行为特征,从而更好地做好今后银屑病医学教育和管理工作,我们参考有关文献??,3??设计了一份专门问卷,评估其对自身疾病的认知水平、态度和行为方式。现将结果报道如下。

摘要：目的通过构建生存素(survivin)的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人黑素瘤M14细胞生存素表达的抑制作用,为后续研究奠定基础。方法设计有小发夹结构的生存素siRNA对应模板DNA序列,克隆至pRNAT-H1.1/neo质粒,构建重组质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin,转染人黑素瘤M14细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹检测生存素表达。结果酶切及测序结果证实重组质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin构建成功。将重组质粒及空载体(阴性对照)转染M14细胞48 h后,siRNA处理组M14细胞生存素表达较空白对照组显著下降,表达抑制率在mRNA和蛋白水平分别为62.3%±1.5%和53.6%±0.9%。结论生存素siRNA表达质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin可抑制人黑素瘤M14细胞生存素的表达。

摘要：目的构建BRAF基因序列特异性的短发卡RNA(Short Hairpin RNA,shRNA)质粒载体。方法根据文献已发表的BRAF基因序列,设计合成3条BRAF特异性的shRNA编码序列(其中一条shRNA特异性针对黑素瘤中最常见的BRAF V599E错义突变设计)和一条与人基因组无同源性的阴性对照shRNA编码序列。将退火后的双链shRNA编码序列重组于pGenesil-1质粒中,进行双酶切和测序鉴定。结果双酶切显示shRNA编码序列被成功插入pGenesil-1质粒中,测序结果证实插入片断与设计序列完全一致。结论所设计的shRNA编码序列被正确插入质粒骨架,成功构建了BRAF基因序列特异性的shRNA质粒载体。

摘要：【编者按】医改中的公立医院改革难度大、复杂、涉及面多，没有现成经验，需要我们解放思想，大胆创新，破解难题，努力走出一条适合我国国情的公立医院改革之路。改革的重点是对现有公立医院经济运行机制进行重新设计与再造，建立和完善医院的法人治理结构，最终建立高效规范的医疗卫生机构运行机制和模式。

摘要：目的 构建小鼠Cbl-b基因RNA干扰（RNAi）的真核表达质粒,并初步鉴定其干扰效果,为后续研究Cbl-b在黑素瘤免疫治疗中的作用奠定基础.方法 根据基因库提供的Cbl-b cDNA序列,设计并合成4对短发夹结构的互补DNA序列,克隆至载体PGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,并予以DNA测序鉴定.重组干扰质粒构建成功后,将干扰质粒与Cbl-b过表达载体共转染293T细胞,于转染后48 h,通过实时荧光定量PCR法及蛋白质印迹法检测各质粒对Cbl-b基因的表达抑制效应.结果 测序分析证实,4对shRNA寡核苷酸序列分别成功插入至shRNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo中,将构建成功的PGPU6/GFP/Neo-shRNA质粒与Cbl-b真核表达载体共转染细胞48 h后,通过荧光实时定量PCR法及Western印迹测定,发现4条shRNA序列对Cbl-b的表达均有一定的抑制效应,其中以1号shRNA序列重组质粒对Cbl-b表达的抑制程度最高（P＜0.05）.结论 成功构建并筛选出沉默效应最高的Cbl-b shRNA真核细胞表达载体.

摘要：目的构建BRAF基因序列特异性的短发卡RNA(shRNA)质粒载体,检测其对人黑素瘤细胞BRAF基因的干扰作用。方法设计2条BRAF基因序列特异性的shRNA编码序列和1条非特异性阴性对照序列,插入质粒pGenesil-1,双酶切和测序鉴定。用构建成功的3条质粒转染人黑素瘤细胞株A375和M14,分别采用RT-PCR和蛋白印迹检测其BRAF基因的mRNA和蛋白表达。结果所设计的shRNA序列被正确插入质粒pGenesil-1。非特异性对照质粒neg对黑素瘤细胞BRAF基因表达不产生干扰,2条序列特异性质粒braf 1和braf 2抑制了BRAF基因mRNA和蛋白的表达,其中braf 1干扰效果最为明显,最高抑制率可达90%。结论质粒介导的shRNA可成功干扰人黑素瘤细胞BRAF基因的表达,其抑制时间可持续至少1个月。

摘要：目的：研究在存档石蜡包埋皮肤组织标本中提取RNA及进行逆转录PCR的可行性和稳定性。方法：分别抽取1997年、1999～2001年、2004年3个时间段的存档标本各10例，经过蛋白酶K消化后用异硫氰酸-酸性苯酚法提取RNA，设计3对β-Actin不同产物长度的引物，其目的片段的长度分别为445bp、205bp和112bp，比较了以各特异性下游引物及随机引物进行逆转录PCR的结果。结果：随机引物的阳性率很低，产物长度为112bp时很稳定，经卡方检验与另外两个长度间有显著性差异，而各年龄组间无统计学差异。结论：在石蜡包埋组织中提取RNA并进行逆转录PCR，方法稳定，可进行大规模的回顾性研究。

摘要：目的探索不同浓度配比的他扎罗汀倍他米松乳膏治疗寻常型银屑病的疗效和安全性,筛选人体使用的最佳药物配比浓度。方法采用多中心、随机、双盲、多剂量对照研究设计,2008年12月至2009年4月,中国医学科学院皮肤病医院等7个研究中心共纳入180例寻常型银屑病患者,按1∶1∶1∶1∶1比例随机分配进入4个试验组(他扎罗汀/二丙酸倍他米松浓度配比分别为0.025%/0.025%、0.05%/0.025%、0.025%/0.05%、0.05%/0.05%,简称为试验1、2、3和4组)和对照组(基质),每日用药1次,持续4周。用药后第1、2、4周分别评价各组药物的疗效和安全性。多组计量资料比较采用方差分析和LSD-t检验,多组分类资料的比较用χ^2检验或Fisher精确概率检验,采用CMH法分析各组的银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)反应率数据。结果用药4周,试验1、2、3、4组和对照组改善达PASI75的患者分别为11例(30.56%)、12例(33.33%)、12例(33.33%)、19例(52.78%)和2例(5.56%),各试验组达PASI75的患者比例均显著高于对照组(均P0.05)。结论0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏可作为后继治疗寻常型银屑病临床研究的推荐配比浓度。

摘要：黑素瘤是高死亡率的皮肤肿瘤,鉴定出与黑素瘤发病及进展相关的蛋白质有助于阐明黑素瘤的发病机制,临床上应早期诊断以提高疗效.近年来,比较蛋白组学、蛋白质表达谱等多种蛋白质组学研究方法应用于黑素瘤发病机制的研究,有助于明确相关细胞信号通路蛋白的功能,阐明肿瘤耐药机制、发现可能的肿瘤标记物以利于早期诊断、判断疗效和预后.