摘要：免疫缺陷者肺部曲霉感染罹患率及病死率均高,虽然肺部真菌感染的治疗需要全身用药,但抗真菌药物局部雾化吸入作为一种辅助治疗仍为颇具吸引力的选择,因药物局部浓度高,全身暴露量小,可避免全身应用所致的不良反应。目前的循证医学依据仅限于在血液系统恶性肿瘤和肺移植患者应用两性霉素B预防真菌感染,据了解,伊曲康唑、伏立康唑和卡泊芬净雾化吸入已在研究中。根据临床试验评价两性霉素B各种制剂雾化吸入结果不一致,目前尚不能推荐常规应用抗真菌药雾化吸入,尚需进行设计良好的随机对照试验,以评价抗真菌药物雾化吸入的有效性和安全性。

摘要：目的疫苗是预防流感所致疾病的最有效方法,MicroRNA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有miRNA Let-7b结合靶位PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对A/Nanjing/108/2009H1N1的PA、PB1、PB2与let-7b的靶序列选定PB1基因为最优序列后,通过基因突变,插入Let-7b的结合靶位;构建p DP2000重组表达载体,设计p DP-mu-PB1,同时设计对照组p DP-sclb-PB1,并与其余7个质粒共转染MDCK细胞和293T细胞拯救病毒;留取上清接种鸡胚尿囊腔,血凝法检测病毒,TCID50检测病毒滴度;提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增病毒c DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析鉴定病毒。结果选择PB1片段最优序列(位置83 bp-107 bp),突变片段改变了3个氨基酸,同时有3个碱基不能与Let-7b靶序列配对;酶切鉴定重组质粒构建正确;重组病毒miRT(miRNA target elements)-H1N1和scramble(scbl)-H1N1的血凝效价分别为1∶32和1∶64,病毒滴度为4.68×105TCID50/m L和7.94×104TCID50/m L;测序确认突变病毒包含目的片段。结论构建成功重组病毒株,为进一步的毒力评估实验奠定了基础。