摘要：采用自行设计的问卷,对昆明医科大学第二附属医院近5年获资助的教研教改课题负责人进行问卷调查,在了解教研教改研究现状的基础上,重点剖析制约教研教改研究成果转化为教学资源的因素并提出相应的对策。

摘要：目的:观察miR-214对人卵巢癌细胞株SKOV-3中Sema4D表达水平的影响,探讨miR-214对Sema4D的调控作用。方法:运用RT-PCR法检测卵巢癌细胞株SKOV-3中miR-214及Sema4D mRNA的表达情况,采用West Blot法检测Sema4D蛋白的表达情况;设计并合成miR-214模拟物和miR-214抑制剂,二者空白对照序列(模拟物对照、抑制剂对照),分别以脂质体liposome 2000包裹后转染人卵巢癌细胞株SKOV-3,并设立空转liposome 2000(lipo 2000)为对照。转染后24 h检测Sema4D mRNA及蛋白的表达变化。实验数据采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果:SKOV-3细胞株miR-214及Sema4D表达阳性;转染后24 h模拟物组、模拟物对照组、抑制剂组、抑制剂对照组、脂质体组Sema4D mRNA相对表达水平分别为0.20±0.30、0.39±0.16、1.02±0.36、0.53±0.23和0.28±0.13;蛋白相对表达水平分别为0.10±0.15、0.30±0.15、1.15±0.57、0.51±0.12和0.52±0.27;模拟物组Sema4D mRNA及蛋白相对表达水平均明显低于模拟物对照组及脂质体组(P<0.05);抑制剂组Sema4D mRNA及蛋白相对表达水平均明显高于抑制剂对照组及脂质体组(P<0.05)。miR-214负向调控Sema4D。结论:人卵巢癌细胞株SKOV-3中,Sema4D是miR-214的靶基因,miR-214可通过下调Sema4D mRNA和蛋白表达水平从而发挥该靶基因转录和翻译水平的负性调控作用。

摘要：目的观察mi R-145对宫颈癌Hela细胞C-myc表达的影响,探讨mi R-145对C-myc的调控作用。方法以RT-PCR检测法检测Hela细胞中mi R-145和C-myc m RNA的表达。运用West Blot检测法检测C-myc蛋白的表达情况;设计并合成mi R-145的模拟物和mi R-145的抑制剂,以及两者的空白对照序列(模拟对照,抑制剂对照),用脂质体Liposome2000分别包裹二者后以使其转染,同时设立空转Liposome2000用作对照。转染后24 h分别检测C-myc m RNA和蛋白的表达变化。实验数据采用单因素方差分析和t检验进行统计分析。结果Hela细胞中mi R-145和C-myc的表达呈阳性。转染24 h后,模拟组,模拟对照组,抑制剂组,抑制剂对照组及脂质体组中C-myc m RNA相对表达水平分别为(0.40±0.32)、(0.59±0.18)、(1. 22±0.38)、(0.73±0.25)和(0.48±0.15);蛋白相对表达水平分别为(0.30±0.17)、(0.50±0.17)、(1. 35±0.59)、(0.71±0.14)和(0.72±0.29);模拟组C-myc的m RNA和蛋白相对表达水平显着低于模拟对照组和脂质体组(P<0.05)。而C-myc的m RNA和蛋白在抑制剂组中的相对表达水平显着高于抑制剂对照组和脂质体组(P <0.05)。结论人宫颈癌Hela细胞株中, C-myc是mi R-145的靶基因, mi R-145通过下调C-myc m RNA及其蛋白的表达水平,发挥负向调控C-myc的作用。