摘要：建立多重PCR诊断方法。以复活羊败血性链球菌病活疫苗作为研究对象,根据细菌16S rRNA基因通用引物和羊败血性链球菌种属特异性sodA基因,参考文献设计合成引物并进行PCR扩增。结果显示:(1)疫苗株接种BHI增菌培养,细菌生长缓慢,24 h后BHI培养基变浑浊;在血平板上形成有光泽、透明湿润、黏稠,表面光滑、边缘整齐,露滴状细小、灰白色的菌落,菌落周围有明显的β溶血。(2)羊败血性链球菌病疫苗株细菌镜检结果显示,镜检可见呈革兰氏染色阳性,常成对或3~5个短链排列的球形或椭圆形球菌,有荚膜。(3)羊败血性链球菌病疫苗株核酸提取结果显示,提取核酸稳定性良好,可用于后续实验研究。(4)PCR扩增结果显示,该方法特异性和敏感性好,可为羊败血性链球菌病的实验室诊断检测和分子流行病学调查提供技术支撑。研究认为,多重PCR检测方法简便、快捷,敏感性和特异性良好,技术易掌握,普遍适合基层单位使用,可快速获得诊断结果,确定病原,为临床合理用药提供科学依据。