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以实时荧光定量PCR技术检测转基因玉米MON88017
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《作物学报》2011年 第11期37卷 2117-2121页
作者:袁磊 孙红炜 李凡 李宁 赵蕾 路兴波山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室山东济南250100 山东商务职业学院食品工程系山东烟台264670 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 
根据转基因玉米MON88017的左侧侧翼序列和玉米内标基因(zSSIIb)分别设计特异性引物及Taqman探针,通过实时荧光PCR技术建立MON88017的定量特异性检测方法。利用含有内标基因和侧翼序列的标准质粒分子,建立了玉米内标基因和侧翼序列的...
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转植酸酶基因玉米phyA2基因标准质粒分子构建及其检测应用
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《作物学报》2013年 第8期39卷 1501-1506页
作者:张广远 孙红炜 李凡 杨淑珂 路兴波 赵蕾山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 
质粒分子以其良好的适应性被较多地用作转基因标准材料的替代品。本文根据转植酸酶基因玉米phyA2基因设计引物与探针,并构建了一种包含phyA2基因片段(243 bp)和内标基因片段(178 bp)的质粒分子pPZ。选取不同转基因模板DNA作用于phyA2特...
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转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化
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《作物学报》2013年 第7期39卷 1141-1147页
作者:张广远 孙红炜 李凡 杨淑珂 路兴波 赵蕾山东省农业科学院植物保护研究所山东省植物病毒学重点实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 
转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异...
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转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测
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《作物学报》2010年 第2期36卷 361-364页
作者:袁磊 孙红炜 杨崇良 尚佑芬 路兴波 赵蕾山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 
采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引...
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转基因大豆BPS—CV127-9PCR定量检测研究
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《大豆科学》2012年 第5期31卷 808-812页
作者:李宁 赵蕾 孙红炜 李凡 杨淑珂 路兴波山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室山东济南250100 济宁医学院公共卫生学院山东济宁272067 山东师范大学生命科学学院山东济南250014 
采用SYBRGreen实时荧光定量PCR技术,建立转基因大豆BPS—CV127-9的定量检测方法。通过设计特异引物,扩增内标准基因1ectin和***127-9的5’侧翼序列,建立2种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且...
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转基因玉米转化体特异性寡核苷酸芯片检测方法的研制
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《作物学报》2009年 第8期35卷 1432-1438页
作者:路兴波 武海斌 王敏 李宝笃 杨崇良 孙红炜山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100 青岛农业大学植物保护学院山东青岛266109 
根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度...
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9种大豆制品中转基因成分定性PCR检测
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《食品科学》2008年 第2期29卷 234-237页
作者:孙红炜 路兴波 杨崇良 尚佑芬 赵玖华 王升吉山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100 
本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆...
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转基因玉米转化体特异性PCR检测技术研究
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《玉米科学》2009年 第1期17卷 65-70页
作者:武海斌 路兴波 孙红炜 杨崇良 李天玉 李宝笃青岛农业大学植物保护学院山东青岛266109 山东省农业科学院植物保护研究所济南250100 新泰市农业局山东泰安271000 
根据不同转基因玉米中重组DNA结构,分别对转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603设计转化体特异性引物进行PCR检测。在此基础上分别以玉米内参照基因(ZSSIIb)作对照,对Bt11、Mon810、TC1507和GA21、NK603、Bt176...
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转基因玉米的定性PCR检测
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《山东农业科学》2009年 第11期41卷 8-10页
作者:袁磊 赵蕾 孙红炜 颜世磊 路兴波山东师范大学生命科学学院山东济南250014 山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100 
根据玉米内参照基因zSSIIb和转基因玉米中常见的CaMV35S、NOS、Bt、hpt等基因的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地将转基因玉米的目的基因检出,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性。由此建立了一套转基因玉...
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转基因番茄定性PCR检测
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《山东农业科学》2011年 第12期43卷 7-10页
作者:李宁 孙红炜 赵蕾 李凡 杨淑珂 路兴波山东师范大学生命科学学院山东济南250014 山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室山东济南250100 
根据番茄内参基因PG和转基因番茄中常见的CaMV 35S启动子、NOS终止子、npt-Ⅱ基因、反义EFE基因等的特异性结构,设计5对定性PCR引物,经定性PCR检测,可以准确地检测出目的基因,说明这5对引物具有较高的特异性和准确性,可以用于转基因番...
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