摘要：目的:从丝瓜籽中克隆核糖体失活蛋白luffin-a基因,并在原核系统进行表达。方法:根据已报道的cDNA序列设计引物,用RT-PCR的方法从成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因,克隆后鉴定核苷酸序列。构建表达载体pET-28 a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达。利用金属离子亲和层析的方法纯化所得目的蛋白。结果:克隆的luffin-a基因及其所编码的氨基酸序列与国外报道的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分别为95%和92%,因而所获得的luffin-a基因是丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a一个新的cDNA序列。经SDS-PAGE分析:luffin-a主要存在于包涵体中。金属离子亲和层析可纯化目的蛋白。结论:本研究成功地克隆了luf-fin-a一个新的序列,并建立了该蛋白的原核表达系统,同时利用亲和层析可一步法纯化获得目的蛋白。

摘要：目的 :了解我国人群中是否存在SEN病毒 (SENV)感染 ,并分析SENV国内分离株的部分基因序列。方法 :在SENV的保守区设计引物 ,建立巢式PCR方法检测血清中SENVDNA ,并对PCR产物进行克隆、测序。结果 :7例非甲～非庚型肝炎 ,且输血传播病毒 (TTV)阴性患者中 ,2例SENV阳性。其中一株的序列与意大利SENV D株 (AX0 2 5730 )相对应位置核苷酸序列同源性为90 %。结论 :本研究证实了我国存在SENV感染 ,建立了检测SENV的PCR方法 ,并对SENV部分基因进行了克隆及测序 。