摘要：锥体虫病在珠三角大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖中频发,造成巨大经济损失.为开展大口黑鲈锥体虫(Trypanosoma micropterus)早期诊断,该研究以大口黑鲈锥体虫18S rDNA保守序列作为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立了一种荧光定量检测方法,并对该方法的灵敏性、重复性和特异性进行评估.结果表明,该方法的循环阈值(Ct值)与锥体虫靶基因的质粒浓度(1.27×10^(1)~1.27×10^(8) copies/μL)呈显著的线性回归函数关系,R2为0.999 1,其扩增效率为99.9%.该方法最低可检测13 copies靶基因,具有稳定的重复性和良好的特异性,组内和组间变异系数均小于2%,对池塘多种生物和细菌均无扩增反应.通过检测发病大口黑鲈倍比稀释后的血液,可检测到1.4个锥体虫,其Ct值为31.38.综上,该方法具有良好的特异性、重复性和灵敏性,可为该病早期诊断和流行病学调查提供了技术支撑.