摘要：城市地铁施工爆破对近接建筑物的安全影响及防护技术,是行业持续关注的热点和难点问题。针对硬岩地层隧道非电毫秒分段延期爆破减震效果难以满足安全振速标准问题,依托贵阳轨道交通2号线省医站4号出入口暗挖隧道工程,开展了数码电子雷管错相减震爆破技术的应用研究。结果表明:利用数码电子雷管起爆精准授时特点,基于错相减振原理优化各炮孔之间的微差时间,控制孔间振动波主振相错开约半个周期,可实现降低爆破振速的目的;在不改变炮孔数量、单孔装药量的情况下,仅调整炮孔爆破延期时间,相同位置测点爆破振速由2.71 cm/s降至1.39 cm/s,减小48.7%。通过工程应用试验,保证了邻近老旧建筑物的安全,提高了效率,缩短了工期。

摘要：基于CRISPR-dCas9的基因转录激活表达能够避免基因异位表达带来的表型干扰,同时使基因有效地特异性表达。该研究利用新型CRISPR-Act3.0表达系统,在毛果杨(Populus trichocarpa)中对维管形成层特异表达转录因子ANT(AINTEGUMENTA)进行基因转录激活,创制遗传材料,并对基因的功能进行分析。首先对毛果杨PtrANTs转录因子进行同源分析,选取其中的PtrANT-4进行后续研究,对该基因进行克隆并利用荧光定量PCR分析其在各组织中的表达情况;其次在PtrANT-4启动子上设计3条gRNAs,构建CRISPR-dCas9转录激活表达载体,利用原生质体瞬时转化法检测该载体的表达;最后将该表达载体利用农杆菌介导法转化毛果杨,获得PtrANT-4转录激活遗传材料。结果表明:毛果杨中有4个PtrANTs转录因子,选取的PtrANT-4基因CDS序列全长为2 058 bp,编码685个氨基酸,在毛果杨侧生分生组织维管形成层特异表达。基于CRISPR-Act3.0表达系统成功构建的转录激活载体,在毛果杨木质部原生质体中转化后具有激活PtrANT-4表达的作用。获得的遗传转化植株中PtrANT-4基因仅在茎维管形成层中的表达量显著提高,说明PtrANT-4在茎维管形成层发育过程中可能起重要作用。该研究为PtrANT的功能研究奠定了一定研究基础,同时为维管形成层干细胞发育的机制研究提供了重要的遗传材料。