摘要：目的了解受艾滋病(AIDS)影响儿童的监护人(简称监护人)情况,为防治工作提供依据。方法采取普查法,利用自行设计的调查问卷对监护人开展调查。结果共有1322名监护人纳入调查,其中母亲占38.43%(508名)、父亲占48.41%(640名);76.85%(1016名)的监护人感染艾滋病病毒(HIV),其中异性性传播占83.46%(848名),其中68.90%(700名)感染HIV的监护人接受艾滋病抗病毒治疗(ART)。感染HIV的监护人与非感染HIV的监护人在自报健康状况、子女最近一次患病时是否去医疗机构就诊、承担子女医疗费用的感受、是否获得过生活救助以及生活水平的自我评价等方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论受艾滋病影响儿童的监护人以父母为主,监护人感染HIV的比例较高,建议各级政府进一步建立和完善对受艾滋病影响儿童及其监护人在内的关怀救助机制。

摘要：凝血酶原时间(PT)测定按规定采用109mmol/L的枸橼酸钠比全血1∶9的标准进行抗凝,但实际工作中,临床护士常不能严格按此比例采取血液标本送检,导致PT测定结果延长,出现误差.为此,特设计五组不同的抗凝比例全血进行TP测试结果的比较,以说明正规操作的重要性.

摘要：目的建立一种检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法。方法提取134例心脏瓣膜置换术患者的外周血基因组DNA。针对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性引物。PCR反应体系中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,样本经扩增后结合熔解曲线分析,确定每个样本的基因型。结果 VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型。134例患者中,VKORC1 1173C>T基因型TT、TC和CC分别有111例、21例和2例,各占82.8%、15.7%和1.5%;CYP2C9 1075A>C基因型*1/*1和*1/*3分别有121例和13例,各占90.3%和9.7%,未检出纯合子*3/*3基因型。结论基于荧光染料SYBR GreenⅠ的实时荧光PCR分型方法操作简便、价格低廉、结果准确可靠,适于临床实验室对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C的基因分型。

摘要：目的:探讨肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)阻断PYR复合体(polypyrimidine complex)与DNA序列结合对γ-珠蛋白基因表达的影响。方法:设计并合成PYR-PNA、β-PNA和RS-PNA(随机序列PNA),以阳离子脂质体lipofectamine 2000为载体,将PNA转染到K562细胞中。用RT-PCR和Western blot技术分别在转录水平和蛋白翻译水平检测K562细胞在转染24、48和72 h后γ-珠蛋白基因的表达情况。结果:PYR-PNA组在转染24、48和72 h后γ-珠蛋白基因mRNA和蛋白表达水平均显著高于RS-PNA组和空白对照组(P<0.05),其中以转染48 h后的表达上调最为明显,分别为空白对照组的2.0和2.5倍。结论:PYR-PNA可显著上调K562细胞中γ-珠蛋白基因的表达;本研究为β-地中海贫血基因治疗提供了新的研究思路。

摘要：目的 确定1个白细胞Pelger-Huёt异常(Pelger-Huёt anomaly,PHA)家系LBR基因的突变类型并分析其临床特征.方法 提取该家系成员及正常对照的基因组DNA,针对LBR基因的14个外显子分别设计引物并进行PCR扩增.先将家系先证者和1名正常者的扩增产物进行Sanger测序,将测序结果与GenBank中所提供的LBR基因参考序列进行比对,筛选出突变位点.对家系其他成员及100名正常对照者进行相应突变位点验证.应用PolyPhen-2和SIFT软件预测突变位点对蛋白功能的影响,并用SWISS-MODEL软件对蛋白结构进行模拟分析.结果 PHA家系3例患者的LBR基因第8外显子上携带有c.893G>A突变,导致第298位氨基酸由甘氨酸替换为谷氨酸(*** 298 Glu).该突变位点在家系其他成员和100名正常对照未发现.该突变的蛋白功能预测均为有害,分子模拟显示突变后LBR蛋白的三维构象发生改变.结论 LBR基因c.893 G>A(*** 298 Glu)突变导致该家系白细胞Pelger-Huёt异常.该突变在国际上未见报道,丰富了LBR基因突变谱.

摘要：目的建立基于焦磷酸测序技术的维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因分型的方法,用于检测华法林药物代谢酶相关基因多态性。方法收集50份健康人外周血样本,提取全血基因组DNA。针对VKORC1-1639G>A、CYP2C9 430C>T和CYP2C91075A>C 3个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套带生物素标记的扩增引物和测序引物。样本经PCR扩增后进行焦磷酸测序,结合信号峰型分析每个样本基因型,以Sanger测序法为对照,比较两种方法检测基因型结果的一致性。结果根据待测位点出峰的碱基和峰高,可以清晰判断3个SNP位点的基因型,50份样本中,VKORC1-1639G>A基因型AA和AG分别有41例和9例,各占82%和12%;CYP2C9基因型*1/*1和*1/*3分别有45例和5例,各占90%和10%,未检出等位基因CYP2C9*2。焦磷酸测序技术与Sanger测序法所检测的基因型结果一致。结论焦磷酸测序技术在SNP基因分型中具有操作简便、耗时短、成本低和结果准确可靠等优点,该检测方法可快速对CYP2C9和VKORC1的SNP位点进行分型。