摘要：目的 基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念优化并验证5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺的设计空间。方法 以样品处理量(sample handling capacity,SHC)、多糖回收率(polysaccharide recovery rate,PRR)为关键质量属性(critical quality attributes,CQAs),通过部分析因试验确定p H、氯化钠浓度、多糖浓度为关键工艺参数(critical process parameters,CPPs),再通过Box-Behnken设计优化CPPs,基于二次多项式回归模型建立设计空间,并进行验证。结果 方差分析结果显示,模型的P均0.05,表明该模型可较好地描述CQAs和CPPs之间的关系。最终获得的操作空间为:pH 7.7~7.9,氯化钠浓度220~280 mmol/L,多糖浓度1~1.6 mg/mL。结论 基于Qb D理念优化的5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺设计空间可提高工艺过程的稳健性和灵活性。

摘要：目的基于质量源于设计(quality by design, QbD)理念,确定伤寒沙门菌(Salmonella typhi)中试规模(200 L)的培养工艺。方法运用QbD通过分析伤寒沙门菌培养工艺核心指标、培养过程,以确定对核心指标可能产生影响的因素。采用单因素试验对pH控制值、溶氧控制值和补料方式等进行考察,通过中试规模(20 L)培养工艺桥接和中试规模(200 L)培养工艺的放大,分析中试规模培养条件及发酵液中伤寒Vi荚膜多糖含量等。结果连续培养了6批次200 L规模发酵液,培养8 h时发酵液中伤寒Vi荚膜多糖含量均≥43.33μg/mL(期望值);培养条件:(1) pH控制值为7.2;(2)溶氧控制值为35%;(3)补料方式为培养初始补加葡萄糖溶液使其质量浓度为3 g/L,培养过程中补加葡萄糖溶液使其质量浓度保持在1~3 g/L。结论通过分析200 L规模培养过程监测数据,成功在中试规模(200 L)完成伤寒沙门菌培养工艺放大。