摘要：目的寻找能同时扩增泌尿生殖道感染常见病原菌序列的各类通用引物,为下一步设计探针进行基因芯片快速检测打下基础。方法查询基因资料、确定靶基因序列、用clustalx1.83比对序列,分析后确定了念珠菌、细菌类、疱疹病毒类三类通用引物,引物合成后用标准序列检验。结果三对引物均能扩增出对应的病原菌基因序列,PCR产物经测序分析,证实与预期相符。结论根据病原微生物目标序列设计的通用引物能有效扩增相应病原菌,通用性好,特异性高。

摘要：本文针对某工程倾斜塔柱外倾角度大于25度的特点,详细介绍了脚手架设计安装、钢筋定位成型以及模板设计定位等全部施工过程。

摘要：文献中尚未见多种血管活性药物在同一实验条件下进行比较研究的报道,为此,我们在相同条件下进行了中西医血管活性药物可乐定、呱唑嗪、心痛定,汉防己甲素、硝酸甘油及当归注射液对鼠肝硬化门脉高压作用的实验研究。设计及方法雄性大白鼠80只,随机分为正常对照、生理盐水,可乐定、呱唑嗪、心痛定。

摘要：本研究拟建立一个判断肝硬化门静脉高压预后的新模型，探讨其预测价值。一、资料与方法1．研究对象：采用队列研究的设计方法，前瞻性分析106例确诊为乙型肝炎后肝硬化患者。患者均为汉族人，有乙型肝炎病史，乙型肝炎病毒标志物检测阳性，其他病毒标志物阴性，肝酶谱有不同程度的异常。无原发性心、肺、肾疾病及高血压病史。

摘要：目的建立一种新的基于焦磷酸测序技术的HBV前C区／基本核心启动子（pre-C／BCP）突变的检测方法，并验证该方法的准确性、重复性、可靠性及进行初步临床检测。方法通过对基因库中100个HBV基因序列的比对分析，设计出专用的pre-C／BCP焦磷酸测序的PCR扩增引物及测序引物，并以标准质粒作为标准品建立其相应的检测方法。通过对标准质粒及PCR扩增产物、经Sanger测序的HBV血清及基因芯片检测结果分析，以验证本检测方法检测的标本的特异度及本方法的检测可靠性。最后对60例HBV临床血清标本进行了初步的检测。结果本研究成功地建立了pre-C／BCP突变热点的焦磷酸测序方法。其检测结果与pre-C／BCP质粒，Sanger测序法的检测结果符合率达100％（Kappa=1.0），基因芯片检测结果的诊断符合率为91．7％。同一批血清标本的重复率达97．8％，阳性PCR产物测序的重复率100％。充分证明了本方法的准确性、重复性、可靠性。初步批量化检测60份临床标本结果表明，本方法能一次批量检出包括pre-C／BCP的单一、多位点的突变，并发现了一例少见的BCP T1758C突变。结论本实验所建立的pre-C／BCP突变热点的焦磷酸测序方法是一种可一次性检测HBV pre-C／BCP多位点突变的高通量的检测方法。

摘要：目的:在传统基因芯片技术基础上,应用生物传感器技术,研制一种能将基因芯片信号原位放大后达肉眼判读灵敏度,无需专用基因芯片检测仪器就可使用,易于在基层医疗单位推广的薄膜生物传感器基因芯片诊断系统.方法:在薄膜生物传感器基片基础上,经过表面化学处理,使特定的基因捕获探针在传感器表面固定,形成特定检测目的生物传感器基因芯片.并以乙肝病毒YMDD区的特异序列设计为例,通过特定的YMDD区的捕获探针,以矩阵的形式点样于传感器芯片表面来实现本系统.同时,纳米金标记的检测探针取代了传统芯片中的荧光标记探针.扩增后的目的PCR片段与捕获探针、生物素标记探针、链亲蛋白纳米金探针进行反应,最后得到探针-生物素-链亲蛋白-纳米金复合物,并在芯片表面经生物传感器芯片将信号原位放大,获得肉眼观的芯片信号并进行分析,完成芯片诊断.以乙型肝炎病毒YMDD突变为例,观察该芯片系统对临床诊断标本诊断的可靠性.结果:基因芯片的检测信号经生物传感器原位放大后能肉眼判读或借助普通数码照像机或计算机扫描,根据信号出现的特定位置即可确定突变的类型.且该生物传感器基因芯片系统信噪比高,在人工合成的寡核苷酸及临床血清的检测中,均可实现生物芯片阴阳性信号完全的有或无的判读;临床血清标本检测证实,使用该传感器芯片系统对前期经过测序确定为YMDD突变的23份临床血清结果与测序结果完全一致.结论:薄膜生物传感器基因芯片集纳米材料、生物传感器技术及原位放大技术为一体,实现了信号的肉眼判读,具有通用性高,准确可靠,无需大型设备,易于在基层医疗单位推广使用.

摘要：目的建立一种准确、简便、低成本的临床实用型Apo E基因多态性芯片检测技术。方法通过基因文库获取Apo E基因全序列;以Primer Primer 5.0设计探针和引物,oligo6验证。摸索PCR扩增条件,产物测序确认;质粒构建并测序确认。探针点样在含链亲蛋白的基因芯片(专利技术)上,待检样品以生物素d UTP标记3'端进行扩增,然后与基因芯片杂交洗脱,阳性结果为纳米金紫红色的圆点状,肉眼即可判断实验结果。以本法检测160例临床样本,并进行测序验证。结果基因芯片检测完毕后通过肉眼识别紫色点状(生物素-链霉亲和素系统biotin-streptavidin systems,BSAS)分布位置,由此可准确分辨Apo E基因型。临床样本实测结果与测序结果具高度一致性(kappa=0.971,P<0.001)。结论在具备标准基因实验室的条件下即可应用此技术进行Apo E基因多态性分析,可临床常规应用。

摘要：目的建立一种能同时检测氯吡格雷耐药相关的CYP2C19基因4种多态性情况的基因芯片检测方法。方法通过分析筛选人类基因组CYP2C19*2,CYP2C19*3,CYP2C19*4,CYP2C19*5共4种DNA序列,设计制备了氯吡格雷耐药相关的CYP2C19无功能性基因多态性分型的基因检测芯片,并对其特异性及灵敏度进行了评价。结果该芯片可以对白细胞数不低于5×102个/m L的人类血标本基因组DNA进行基因多态性分型。120份质粒及110例临床标本的芯片检测结果与测序结果基本一致。结论应用基于生物传感器的新型基因芯片进行氯吡格雷耐药相关基因多态性检测具有较高的特异性和敏感性,结果准确且易判读,具有较好的应用前景,可以为临床医生提供用药指导。