摘要：禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体。为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4kb片段,插入来自pEGFP-C1质粒的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达盒片段,构建了含EGFP基因的重组质粒pADGFP。采用脂质体介导法,将重组质粒pADGFP与QU株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法筛选纯化表达绿色荧光蛋白的重组QU病毒株rQUGFP。该重组毒的生长曲线与亲本毒一致,连续传代后病毒滴度稳定。结果表明,QU株基因组右侧E4区附近一段包括ORF1、ORF8和ORF9三个开放阅读框的区域为病毒的复制非必需区,且插入的EGFP基因可以稳定表达。为进一步以禽腺病毒QU株为载体构建重组疫苗的研究打下基础。

摘要：为建立一种快速诊断新型鸭源小RNA病毒的检测方法,根据NCBI已公布的病毒基因组序列设计特异性引物,建立了新型鸭源小RNA病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法能特异性扩增新型鸭源小RNA病毒基因序列;对质粒标准品的最低检测限为98拷贝/反应;组内与组间的重复试验变异系数均小于2%;对新分离的小RNA病毒株进行检测,均能扩增出目的基因。综上,本研究建立的检测方法特异性强、灵敏性高、重复性和实用性好,可用于新型鸭源小RNA病毒的快速鉴别诊断。

摘要：传染性法氏囊(IBD)或称甘保罗病是幼鸡的一种急性高度传染性疾病,这种病主要以破环法氏囊中的淋巴细胞和其它器官较轻微的损害为特征。由于严重感染,导致商品鸡群降低了对免疫接种的抗体应答(疫苗失败)或者产生强的接种后反应,也会提高对各种并发感染或继发感染的敏感性,这种作用称为免疫抑制。许多研究报告表明,雏鸡出壳后最初几天内。

摘要：根据新城疫病毒(NDV)融合蛋白和禽流感病毒(AIV)核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156 bp和219 bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT-PCR。试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H5亚型AIV的最低病毒量分别为103.7EID50和103.9EID50。试验结果表明,此次建立的一步法复合RT-PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV感染的快速鉴别。

摘要：鸡新城疫病毒(NDV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)均是危害养鸡生产的因素之一,本研究分别以SPF鸡胚发育情况和抗体滴度评价环糊精包合碘杀灭NDV和IBV的效果。以聚维酮碘(1∶626)作为对照药物,环糊精包合碘设计1∶500、1∶1 000、1∶1 500 3个试验浓度,以NDV和IBV攻毒鸡胚作为负对照。结果表明,NDV病毒对照组平均抗体滴度为8.4,试验组均为0;IBV病毒对照组均出现侏儒胚现象,试验组均未出现侏儒胚;随环糊精包合碘浓度的增大,鸡胚重量有降低的趋势。本研究表明环糊精包合碘能够完全杀灭NDV和IBV,其对鸡胚的刺激性低于聚维酮碘。

摘要：根据鸭瘟病毒UL6和UL7基因序列,设计合成了一对引物,以2株疫苗株1、株强毒株和1株山东分离株DNA为模板,进行PCR扩增,得到预期690 bp的目的片段。将扩增的目的片段克隆到pMD18_T载体,经Amp平板筛选,HindIII、BamHI双酶切鉴定,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定,与参考序列比较,山东分离株与参考序列的同源性为99.7%,其余3株DPV与参考序列的同源性均为100%。应用PCR可检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织中的鸭瘟病毒,表明PCR检测鸭瘟病毒具有很高的特异性、敏感性,该法能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。

摘要：参考禽流感病毒(AIV)基质蛋白(M)基因设计了两对引物,特异性识别其6个不同位点,建立了基于颜色判定的环介导等温扩增反应(LAMP)方法。试验对不同禽源病毒进行了测试,结果发现该方法仅特异性地检出禽流感病毒(H9和H5亚型)核酸,对AIV病毒的检测极限为10 EID50。人工感染病料检测结果与鸡胚病毒分离法的符合率为96.7%。数据表明,建立的LAMP方法特异、敏感、简便,在禽流感的诊断中具有很大的临床应用潜力。

摘要：利用aroA基因设计了 1对引物 ,分别对 10株标准副鸡嗜血杆菌 (HPG)菌株、14株分离的HPG菌株进行PCR扩增 ,结果均得到了与预期大小一致的片段 ,而对 10株非HPG菌株和 3株病毒进行扩增则无相应片段产生 ;该PCR能检测出 10个菌细胞。与常规PCR方法相比 ,aroA

摘要：2019年,从山东某地疑似坦布苏病毒(TMUV)感染的发病鸭和发病鹅组织病料中进行病毒分离,并通过RT-PCR、间接免疫荧光试验以及基因序列分析,确定分离到1株鸭源和1株鹅源TMUV,并命名为BZ0162和WS12101。将分离株全基因组进行PCR分段扩增、测序,发现BZ0162和WS12101基因组全长包含10 991个核苷酸。全基因组核苷酸同源性比较结果显示,BZ0162和WS12101之间同源性是99.5%,与其他TMUV参考毒株同源性均大于95.7%。E蛋白核苷酸和氨基酸同源性分别大于95.2%和98.0%。遗传进化分析结果显示,BZ0162和WS12101与GenBank最新公布的CHN-JL中国株以及泰国株DK/TH/CU-1亲缘关系最近,处于同一进化分支上。分别成功分离到1株鸭源和1株鹅源坦布苏病毒,为进一步探究坦布苏病毒遗传变异及跨宿主传播机制提供了材料。

摘要：鸡包涵体肝炎主要由Ⅰ群禽腺病毒血清8a型(FAdV-8a)、8b型(FAdV-8b)和11型(FAdV-11)病毒引起,这3种血清型在临床上无法区分,因此有必要建立一种鉴别诊断方法。根据这3种血清型病毒的基因组设计了3对特异性引物,将这些引物放在同一反应体系中,通过优化条件建立了多重PCR鉴别方法。结果显示,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,能快速区分鸡包涵体肝炎中血清8a型、8b型和11型病毒的感染或是上述病毒的混合感染。该方法在临床上进行了初步应用,与经典的病毒分离方法相比,FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11的符合率分别为100%、98%和98%。