摘要：背景：以往利用羊膜提取间充质干细胞的研究多将注意力放在新鲜的羊膜标本上，由于地域和时间的限制，对羊膜进行保存是必须面对的实际问题。目的：实验拟比较从不同保存时间人羊膜标本中分离培养的羊膜间充质干细胞的增殖能力。设计、时间及地点：体外进行的细胞对照观察，于2007—01／200802在郑州大学医学院和生物工程系完成。材料：正常剖宫产的健康产妇志愿捐献的羊膜12份，孕38周，检测乙肝5项、HCV、HIV、梅毒等其他相关传染性指标均呈阴性。方法；无菌条件下将每份新鲜完整的羊膜平均分成3组，即新鲜1h组、4℃放置24～36h组、4℃放置48～60h组。将3组标本剪碎，胰蛋白酶-胶原酶联合消化，过滤后收集单细胞悬液，以2×10^8L^-1密度接种，加入含胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子的DMEM／F12培养基，贴壁法纯化扩增细胞。主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞形态，绘制生长曲线。取第3代细胞进行免疫组织化学检测和流式细胞仪鉴定。结果：①3组标本消化后都含有多种单个细胞成分，呈圆形、菱形、短梭形、多角形，细胞折光性良好，此外还有多个上皮细胞聚集所成的细胞团。接种后1-3d各组细胞均为潜伏期：4～7d新鲜1h组与4℃放置24～36h组进入对数生长期，细胞增殖活跃，细胞数目呈指数级递增，4℃放置48～60h组仍处于潜伏期；7d后前两组细胞已铺满瓶底，4℃放置48～60h组刚开始指数级递增。②各组细胞神经元烯醇化酶、神经丝蛋白、巢蛋白均呈阳性表达，胶质纤维酸性蛋白呈阴性。各组细胞CD29，CD44均呈阳性表达。结论：保存时间在60h内的人羊膜都可以分离出具有增殖能力的间充质干细胞，但36h内的羊膜标本所分离的间充质干细胞具有较快的增殖能力。

摘要：背景:以往对间充质干细胞分化的报道多为体外培养,甚少涉及宿主体内间充质干细胞的分化及辅助因子对其分化的影响。目的:探讨人羊膜间充质干细胞移植对脑损伤大鼠行为学和空间学习记忆能力的影响,以及神经生长因子、纤维蛋白胶在人羊膜间充质干细胞移植中的作用。设计、时间及地点:细胞学体内对照观察,于2006-07/2007-01在郑州大学医学院完成。材料:正常足月剖腹产胎儿的胎盘由郑州大学第一附属医院妇产科提供。Wistar大鼠90只,随机分为5组:假手术组、模型对照组、细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组,18只/组。方法:无菌条件下钝性分离胎盘脐带面的羊膜,经胰酶消化制成单细胞悬液,贴壁法纯化扩增,传至第3代的人羊膜间充质干细胞备用。假手术组只开颅钻孔不进行硬膜外撞击,其余4组大鼠均采用自由落体硬膜外撞击法建立脑损伤模型。造模1d后,模型对照组在损伤区分点注射生理盐水40μL;细胞移植组注射含1×107个人羊膜间充质干细胞的等量生理盐水;细胞+神经生长因子组在细胞移植组基础上于造模后连续2周每日腹腔注射0.5μg神经生长因子;细胞+纤维蛋白胶组注射人羊膜间充质干细胞与纤维蛋白胶混合液40μL;假手术组不行细胞移植。主要观察指标:行为学评分,Morris水迷宫检测潜伏期,脑组织切片免疫组化染色检测神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达。结果:移植后7d,与模型对照组比较,细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组行为学评分均明显升高,但细胞移植组升高幅度明显低于后2组(F=155.322,P<0.05)。移植后3周,与模型对照组比较,细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组潜伏期均明显缩短,但细胞移植组缩短幅度明显小于后2组(F=22.678,P<0.05)。移植后4周,人羊膜间充质干细胞能够在大鼠损伤脑组织内分化,与神经生长因子、纤维蛋白胶混合移植可提高神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的阳性表达率(F=705.406,F=424.884,P<0.05)。结论:人羊膜间充质干细胞可改善脑损伤大鼠行为能力及空间学习记忆能力,分化后能表达神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白,神经生长因子与纤维蛋白胶均可增强细胞移植治疗效果。

摘要：目的　应用神经导航系统进行显微外科手术 ,尽可能减少神经外科手术创伤 ,准确寻找颅内微小病灶 ,提高手术精确度 ,降低手术并发症 ,达到手术微创目的。方法　术前将病人的CT影像学数据资料装载于手术导航神经系统计算机工作站 ,进行三维建模 (包括头皮、病灶、重要功能区及标志点 )、靶点设定、手术切口入路设计 ,精确定位微小病灶位置 ,术中实时定位监测手术进程 ,随时纠正手术偏差。结果　术中导航对颅内病变、重要结构定位准确 ,定位误差均在 3mm以内。结论　手术导航系统能以最短、最安全的路径精确地寻找微小病灶的位置、术中标识病灶的范围 ,将寻找病灶的损伤降至最小 ,完全切除病灶 ,降低死亡率、病残率 ,增加肿瘤的控制时间 ,提高手术效果 。

摘要：背景:近年来研究表明神经节苷脂(gangliosides,GM-1)能够修复中枢神经系统中神经元的损伤。目的:观察不同剂量神经节苷脂(GM-1)对神经干细胞增殖和分化的影响。设计:完全随机对照的开放实验。地点与材料:研究地点为郑州市第二人民医院脑外科和郑州大学医学生物工程研究所。材料为胎龄10周流产胚胎脑组织。方法与主要观察指标:从人胚胎脑组织分离出神经干细胞,培养于含bFGF和B27的DMEM/F12细胞营养液中,实验组加入不同浓度的GM-1,用MTT比色分析法测定细胞增殖能力。用含3%血清的DMEM/F12营养液诱导细胞分化,每间隔6h于倒置相差显微镜下观察细胞分化情况。结果:5d,10dMTT比色显示:bFGF(20mg/L)+B27+DMEM/F12和GM-1(33.5mg/L)+B27+DMEM/F12两组间t检验,P值均>0.05;GM-1(33.5mg/L)+B27+DMEM/F12与B27+DMEM/F12两组间t检验,P值均0.05。分化实验发现,接种6h后,(3%)血清+DMEM/F12组神经球周边可见明显的细胞突起,呈放射状向周围伸出,而3个实验组和阴性对照组的细胞突起短且细小,随着培养时间的延长,各组的细胞突起均逐渐伸长,3个实验组分化能力低于对照组,与阴性对照组之间无明显差异。结论:GM-1能够维持神经干细?

摘要：背景:神经干细胞体内可发育成终末神经细胞,替代受损组织,重建神经环路恢复功能。目的:探讨神经干细胞移植对动物实验性脑挫裂伤的治疗作用。设计:完全随机对照实验研究。地点与材料:郑州市第二人民医院脑外科。18只Wistar(来源于河南省实验动物中心)成年大鼠雌雄不拘,清洁级。干预:将18只大鼠随机分为3组。对照组:单侧大脑半球致伤未移植;实验组:单侧致伤行细胞移植;双侧半球致伤组:一侧对照,对侧移植。主要观察指标:损伤区脑组织大体观察和该区脑组织苏木精-伊红染色切片。结果:移植组(侧)大脑半球肉眼观损伤区脑组织基本平坦,镜下见大量新生的细胞和血管,而变性或坏死细胞少见。实验组(侧)大脑局限性凹陷,组织坏死,镜下有细胞变性、坏死,区域性融合呈空泡状,缺乏细胞增生迹象。结论:神经干细胞移植对实验性脑挫裂伤具有显著的修复作用。

摘要：目的探讨脑运动区小病变（直径〈3 cm）的个体化手术治疗方法及效果。方法回顾性分析44例脑运动区小病变病人的临床资料,术前评估心理状态,检查肢体肌力,分析影像学特点,设计手术方法。根据手术方法分组,单纯手术组包括轴外病变10例,采用导航引导下手术切除;监测组包括轴内病变18例,采用导航引导加神经电生理监测下手术切除;唤醒组包括轴内病变16例,采用导航引导、电生理监测及术中唤醒下手术切除。结果单纯手术组均全切;监测组全切除11例,次全切除7例;唤醒组全切除12例,次全切除4例。监测组和唤醒组的全切率及次全切率无统计学差异（P〉0.05）。单纯手术组中2例术后3 d肌力下降,3周后恢复;监测组6例肌力下降,治疗后1例未恢复;唤醒组5例肌力下降,治疗后2例未恢复;治疗后肌力未恢复病人的病理结果均为Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤;监测组与唤醒组在肌力下降程度及恢复情况无明显统计学差异（P〉0.05）。结论对于脑运动区小病变病人,根据病人心理状态、病变影像学特点等制定个体化手术方案,可取得满意的治疗效果。

摘要：颅脑损伤形式多样 ,过程和机制复杂 ,而现有常用的几种国内外颅脑损伤实验装置致伤形式比较简单 ,或者制作复杂、价格昂贵。为更全面、深入地研究颅脑损伤 ,模拟其不同受力方向及强度的实际过程 ,作者自行设计和制作了多方向颅脑损伤打击器的实验装置 ,具有制作简单、携带方便和费用低廉等特点。实验装置主要采用旋转弹簧和模拟单摆两种力学原理 ,产生颅骨和脑组织损伤时的撞击外力。安装弹簧扣前 ,将连接杆旋转至适当角度后释放 ,进行动物颅骨受力部位的预置定位。根据实验要求分别安装不同形状及不同质料的打击锤。安装弹簧扣后 ,将连接杆旋转至不同角度释放 ,即可得到不同的打击力量。去开弹簧扣 ,将打击锤换成橡胶、塑料或木质等制品 ,预置定位方法同前。将连接杆旋转升至不同角度后释放 ,即可模拟单摆运动 ,从而得到不同的打击力量 ,实现对实验动物脑组织的致伤。打击器的两层底座侧方是用活页相连 ,故类似翻书本一样 ,上层底座可在 0°～ 180°之间旋转。实验动物兔头部可安置于半圆形球体固定台上的不同角度 ,两者结合后可实现多方向冲击力的产生和接受 ,见封 2。安装弹簧扣后 ,可以运用旋转弹簧的力学原理产生冲击力 ,此时打击器所释放的力量较大 ,能对颅骨直接造成损伤。　　结果 :旋转弹簧在?