摘要：目的　了解中国慢性乙型肝炎 (CHB)患者中的基因分型情况。方法　根据GenBank中 18株HBVS基因核苷酸序列 ,设计共同的外引物及其因型特异性内引物 ,对中国北方 5个城市 5 95例CHB患者血清进行基因分型 ,并对A、B、C及B、C混合型各一株进行测序。结果　 5 95例血清标本中 ,A型 8例 ,占 1 4 % ;B型 5 3例 ,占 8 9% ;C型 36 0例 ,占 6 0 5 % ;B、混合型 112例 ,占 18 8% ;A、C混合型 14例 ,占 2 4 % ;A、B混合型 15例 ,占 2 5 % ;A、B、C混合型 6例 ,占 1 0 % ;未分型者 2 7例 ,占 4 5 %。 5城市间在B、C及B、C混合型的分布上有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,4份测序结果与PCR基因分型法一致。结论　在 5个城市CHB患者中HBV基因型以C型为主 ,B型次之 ,并见各种混合基因型感染 ,各地区在主要基因型分布上存在显著性差异。

摘要：目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV) 阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法. 方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraI酶切位点(5’TTTAAA3’),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点.同时PCR扩增2份已行HBVRT区基因测序证实未出现rtN236T 变异的慢性乙型肝炎患者血清及自行构建的对照质粒,扩增产物经DraI酶切,30 g/L琼脂糖凝胶电泳后,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析. 结果:所建立的ntPCtk-RFLP方法灵敏度高,可以检测到106copies/L的HBV DNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致. 结论:ntPCR-RFLP方法灵敏、特异、简便、实用,适用于ADV耐药变异的临床监测工作.

摘要：目的:建立多聚酶链式反应．限制性片段长度多态分析(PCR-RFLP)法检测血管紧张素ⅡⅠ型受体基因(ATIR)A1166C位点的多态性．方法:对50例血清抗HBs阳性的健康对照者及46例HBV感染后肝硬化患者的血管紧张素ⅡⅠ型受体基因A1166C位点基因多态性的多态性进行分析．根据血管紧张素ⅡⅠ型受体基因设计引物,在A1166C位设计DdeⅠ酶切位点,根据PCR产物酶切结果判断该位点为A或C．结果:两株纯合子与AT1R序列同源性在99%以上,并在A1166C位点出现预期变异;肝炎和肝硬化两组间A1166C位点无论是基因型还是等位基因均无显著性差异(P>0．05)．结论:PCR-RFLP的方法可用于AT1R基因A1166C位点基因多态性的检测,该位点的变异尚未显示其与肝纤维化有关．

摘要：目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异- rtA181V变异的快速检测方法．方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt181 A)PCR产物中含有Blp Ⅰ酶切位点(5’GCTNAGC3’),而变异株(rt181V)无此限制性酶切位点．选取4份应用ADV治疗1 a以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、Blp Ⅰ酶切、30 g／L琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析．并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各一例进行 HBV RT区基因序列分析及对照质粒的构建．结果:自4份血清标本中检测到2例rtA181V变异．所建立的ntPCR—RFLP方法灵敏度高,可以检测到103 copies／L的HBV DNA;特异性强,其 RFLP分析结果与DNA测序结果一致．结论:应用ntPCR-RFLP方法检测rtA181V 变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于 ADV耐药变异的临床监测工作．

摘要：目的　建立用于 SEN病毒 (SENV)检测的巢式聚合酶链反应 (n PCR)方法。　方法　选择 SENV各亚型间高度保守的 5′端非编码区 (5′-NCR)序列设计 2对特异性引物 ,建立可同时检测 SENV所有亚型的 n PCR方法。对 1 73份慢性乙型肝炎 (CHB)患者血清和 96份正常人血清进行 SENV检测 ,并随机选择 3份 PCR阳性产物进行克隆测序。　结果　倍比稀释实验表明该方法的终检稀释度为 1 0 3。PCR产物克隆测序结果显示 :各分离株与 Genbank收录的 SENV序列相应区段同源性为 95 %～ 96%。CHB患者 SENV感染率为 86.1 % ,正常人为 85 .1 % ,二者差异无显著性 (χ2 =0 .3 81 ,P=0 .5 3 7)。　结论　该方法敏感、特异且简便经济 ,适于开展

摘要：目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异及rtA181V变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株rt236N PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5'-TTTAAA-3'),而变异株rt236T无此限制性酶切位点;使野生株rt181A PCR产物中含有BlpⅠ酶切位点(5'-GCTNAGC-3'),而变异株rt181V无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、限制性内切酶酶切及凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBV RT区基因序列分析。结果建立的ntPCR-RFLP方法可以检测到102copies/L的HBV DNA;RFLP分析结果与DNA测序结果一致,4份血清标本中检测到1份rtN236T变异,2份rtA181V变异。结论应用ntPCR-RFLP方法检测HBV阿德福韦耐药变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于HBV耐药变异的监测。

摘要：目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5′TTTAAA3′),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBVDNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、DraⅠ酶切、3%琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBVRT区基因序列分析。结果自4份血清标本中检测到1例rtN236T变异。所建立的ntPCR-RFLP方法灵敏度高,可以检测到103copies/L的HBVDNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致。结论应用ntPCR-RFLP方法检测rtN236T变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于ADV耐药变异的临床监测工作。

摘要：目的　探讨 PCR法检测临床血标本中人微小病毒 B1 9( HPV B1 9)的应用价值。方法　根据序列比对结果 ,在HPV B1 9核苷酸相对保守区设计引物进行 PCR扩增。应用双脱氧链末端终止法对 HPV B1 9阳性 PCR产物进行克隆测序。结果　应用该法最终检出HPV B1 9的血清稀释度为 1 0 3。序列比较表明 ,用本法检出的 1株HPV B1 9阳性标本与标准株 ( Au株 )核苷酸序列同源性为 92 %。检测肝癌和肝硬化患者血清标本各 1 4例 ,结果 HPV B1 9阳性分别为 8例和 5例。结论　本法可用于 HPV B1