摘要：目的建立1种基于荧光定量PCR扩增原理的联合高分辨率熔解曲线技术(qPCR-HRM),用于耐利福平结核杆菌(RR-TB)的快速检测。方法选取GenBank中结核杆菌rpoB基因序列(利福平耐药决定域),分别设计2对特异性引物rpoB-1R/F、rpoB-2R/F扩增rpoB基因的不同片段,构建荧光定量PCR反应体系,加入HRM饱和荧光染料监测扩增产物进行HRM分析。以H_(37)R_a菌株为阴性对照,检测240株临床诊断肺结核培养菌株对利福平(RFP)的耐药性;以传统的药敏实验结果为金标准,对qPCR-HRM法检测RR-TB的灵敏度、特异度、重复性进行评估。结果 qPCR-HRM法检测RR-TB灵敏度为84.8%,特异度为96.5%,批内、批间变异系数均<1%,检测时间为2h以内。结论 qPCR-HRM法检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高、快速易操作,适合在有条件的基层医疗机构进行推广。

摘要：目的了解目前江苏省各级结核病防治机构结核病实验室资源现况。方法采用中国疾病预防控制中心结核病参比室统一设计的调查表,区县填写市级统一汇总,反馈至省级参比室进行复核、汇总和分析。结果全省共有结核病实验室人员189名,兼职人员占48.7%。其中,30~49岁占69.15%,男女比为1∶1.6,本科及以上学历占75.1%,从事该工作时间≥5年者占56.1%,1年内参加过相关培训的占65.1%。涂片检查人均日工作量>25张的占11.8%,二级生物安全实验室仪器设备100%覆盖。结论江苏省结核病实验室硬件设备比较完善,但人力资源建设需进一步加强,急需推广快速诊断技术,以提高工作效率。