摘要：剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)是牧草上重要的病原线虫,被我国列入检疫性有害生物名单。本研究根据剪股颖粒线虫的rDNA-ITS区序列设计特异性的引物和探针,建立了环介导等温扩增和核酸试纸条检测技术。结果表明,该LAMP-核酸试纸条检测法的特异性强,供试2个剪股颖粒线虫虫株均为阳性,其他23种线虫均为阴性;灵敏度高,最低检测限为3.15ng,检测灵敏度达1/400条2龄幼虫。该法操作简单,对设备要求低,适合口岸推广应用。

摘要：为了快速、准确地检测丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY),根据Gene Bank中PSY的ITS序列设计特异引物Psy1/Psy2和探针P-Psy,建立了常规PCR和实时荧光PCR检测方法。利用引物Psy1/Psy2扩增供试的26株PSY能得到585 bp的预期目标条带,但扩增其它61个非PSY供试菌株不能得到预期产物,检测灵敏度为12 pg菌丝DNA;探针P-Psy对供试26株PSY表现为阳性扩增,而对其它菌株和空白对照均表现为阴性扩增,检测灵敏度可达120 fg菌丝DNA,比常规PCR高100倍;引物Psy1/Psy2和探针P-Psy对5 g土壤中PSY卵孢子的检测灵敏度分别为20 000个和200个。样品检测试验表明两种PCR方法可用于口岸植物检疫中快速、准确和特异地检测丁香疫霉病菌。

摘要：根据长芒苋和苋属其他物种的一个2 bp ITS序列差异设计特异引物和探针,建立了长芒苋的Taq Man实时荧光PCR鉴定方法。应用该方法测试了82个样品,包括23个不同来源的长芒苋样品、57个其他10种苋属样品,以及2个与长芒苋种子形态近似的鸡冠花、藜样品。试验结果表明,所有供试的长芒苋样品均表现为阳性扩增,非长芒苋和空白对照均没有出现阳性扩增。不同浓度长芒苋DNA的检测结果显示,该实时荧光PCR方法的检测灵敏度达2.2 fg/μL。该检测方法可能快速、准确鉴定长芒苋及其种子。

摘要：根据TBRV运动蛋白基因的保守序列设计引物,RT-PCR和IC-RT-PCR能从6个TBRV的分离物中分别扩增到与预期大小相同的DNA条带,序列测定和分析表明所测定的序列为TBRV运动蛋白基因的部分序列,在系统关系树上与TBRV的其它分离物形成一簇,表明所建立的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法是可靠的。

摘要：利用DASELISA对进口大豆上BPMV进行检测发现,从美国进口的部分大豆样品对BPMV的多抗血清呈阳性反应;利用免疫吸附电镜观察发现,ELISA检测阳性的大豆种皮病汁液中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据BPMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计了2对嵌合引物,建立了BPMV的高灵敏的免疫捕获巢式RTPCR(ICnestedRTPCR)检测方法。该方法经免疫捕获、反转录和2轮PCR扩增,能从带毒大豆种子中扩增到预期大小的DNA条带。序列测定与分析表明此条带的序列为BPMV部分CP基因,在系统关系树上与BPMV的其它分离物形成一簇亲缘关系很近。实验表明从进境大豆上检测到了BPMV。