摘要：为研究欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)RIG-I基因的特性,通过设计引物,扩增其序列,克隆至pCE2-TA/Blunt-Zero载体,测序验证后对所获得欧洲鳗鲡RIG-I基因序列进行生物信息学分析及原核表达。结果表明,欧洲鳗鲡RIG-I基因ORF序列有2823 bp碱基,编码940个氨基酸,与日本鳗鲡(***)的序列同源性为96.71%;RIG-I蛋白属酸性亲水性蛋白,不存在跨膜结构,无信号肽,较不稳定,主要分布于细胞质中,有6个保守功能区;SDS-PAGE和western blot结果显示,实现了RIG-I基因在大肠杆菌中的高效表达,为后期制备RIG-I多克隆抗体和进一步探索RIG-I介导的天然免疫在鳗鲡抵御鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)侵染过程中的作用机制提供了研究基础。

摘要：【目的】克隆鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)ORF87基因,分析其序列特征并制备多克隆抗体,为揭示ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用机制提供技术支持。【方法】根据GenBank已公布AngHV参考株(NC_013668)的ORF87基因序列设计引物,从AngHV-FJ株基因组中扩增出ORF87基因,构建重组质粒pMD19-ORF87经酶切鉴定和测序验证后,采用Softberry、ProtParam、CDD、TMHMM、SignalP 5.0、PSORT及BepiPred等在线软件进行生物信息学分析;将ORF87基因克隆至p ET-32a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测及Western blotting鉴定;以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备ORF87多克隆抗体。【结果】克隆获得的AngHV-FJ株ORF87基因为2127 bp,与GenBank已发布的参考序列高度同源(相似性为99.72%),仅存在4个碱基突变;其编码蛋白分子量为80.1 kD,理论等电点(pI)为7.62,不稳定系数为42.38,总平均亲水性为-0.271。ORF87蛋白具有蛋白激酶C超家族(PKC-like Superfamily)的保守结构域,但不具信号肽和跨膜结构域;其亚细胞定位可能位于细胞核和细胞质膜,存在19个潜在B细胞抗原表位,即具有良好的免疫原性。AngHV-FJ株ORF87基因可在大肠杆菌中高效表达,表达获得的融合蛋白约100.0 kD,主要以包涵体形式存在;以融合蛋白免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体效价达1∶16000,能特异性识别AngHV的ORF87蛋白。【结论】AngHV-FJ株源ORF87基因经原核表达载体诱导表达获得的融合蛋白ORF87具有Serine/threonine蛋白激酶活性,以其免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体具有高效价,能特异性识别AngHV感染,可作为亚细胞定位及表达时相分析等蛋白特性研究的工具,用于解析ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用。

摘要：为研究鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)ORF8基因的特性,根据GenBank中AngHV参考株(NC_013668)的ORF8序列设计引物,采取PCR方法从分离的AngHV福建病毒株(AngHV-FJ)基因组中扩增出特异性片段,克隆至pMD19-T载体,经酶切和测序验证,获得了ORF8的基因序列。结果表明:经生物信息学分析,ORF8编码的蛋白稳定性较好,存在跨膜结构且抗原表位多,符合病毒囊膜蛋白的特征;经转录时相分析,ORF8是病毒的早期基因(early gene,E),可能在病毒感染的早期阶段就发挥作用;将ORF8克隆至表达载体pET-32a,转化入大肠杆菌*** BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE及Western blot检验,实现了ORF8在大肠杆菌中的高效表达,进一步通过割胶的方法获得了相对分子质量约为44000的高纯度融合表达蛋白。本研究为下一步评价该表达蛋白的免疫效果和制备抗体,以及开发免疫诊断试剂和疫苗提供了研究基础。

摘要：本文对WAP上网方式作了简要介绍,提出了北京林业大学无线门户服务系统的设计构想和方法,系统分为录取成绩查询和校园网帐号注册充值管理两大模块,对其中的关键技术进行了较为详细的探讨。该系统的应用为学校对外的交流合作,对内信息和服务的获取提供了又一个新的、便捷的方式。

摘要：该文介绍一种基于树的图象的林分三维可视模型．以一株典型形体的树木为原型代表林分的平均木，应用图象重采样技术对该原型木图象按比例缩放生成林分中各株林木的图象．根据投影原理计算每株林木在投影平面上的象素坐标和缩放比例，对各林木图象再次缩放后移动到林木的平面坐标位置合成一幅有立体感的林分图．与基于规则几何体的和基于树的三维造型的林分三维可视模型相比，这种方法产生的林分立体图真实感强，速度快，适合开发成应用软件用于森林与植物景观的设计和仿真．

摘要：决策支持系统(DSS)是国际上近年来最新发展的管理信息技术,本文研究择伐林经营决策支持系统是用于长白山林区天然冷杉林经营管理辅助决策工具。本研究介绍了系统的设计思想与特点,论述了系统结构及功能,并讨论了系统改进方向。

摘要：冬季低温饮水不利于断奶仔猪的生长发育。本试验设计了在规模化猪场保育猪舍适用的恒温饮水系统,实现饮水的恒温化,比较分析饮用温水的试验组与冷水对照组仔猪在生长性能和免疫水平上的变化。结果显示,与对照组相比,试验组仔猪饮水日均和昼夜水温均稳定于26℃左右(24.5~26.6℃);试验组温水的总菌和大肠杆菌数远低于对照组;试验组仔猪平均日增重较对照组提高4.15%(P0.05)。上述结果说明,饮用温水对于断奶仔猪的生长性能有明显促进作用,对免疫水平无明显影响。

摘要：本文采用J2EE技术框架和无线应用技术(WAP),设计了县级森林火险数据报送系统。系统实现了基于手机WAP方式的火险因子数据的手机报送和后台数据处理,提高了县级森林火险预报系统中火险因子数据报送的及时性、准确性和工作效率。

摘要：[目的]为了降低屎肠球菌微胶囊制剂的发酵成本,[方法]用自主分离的一株屎肠球菌作为发酵菌株,用玉米和豆粕替代MRS基础培养基中的碳源和氮源,设计不同替代比例的MRS廉价培养基,经过培养和计数,筛选出价格低廉又适合该菌株生长的廉价培养基。[结果]玉米和豆粕作为碳源和氮源制成的替代培养基适合该屎肠球菌生长;结合价格和培养效果,筛选出碳源50%替代、氮源100%替代的MRS-C50N100替代培养基为适合用于屎肠球菌工业化发酵的廉价培养基。[结论]MRS-C50N100替代培养基既可以极大降低屎肠球菌的发酵成本,又可以使活菌数达到益生菌制剂要求的有效活菌量,可用于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产。

摘要：PDA小班调查原始数据处理系统是应用信息技术重组传统森林资源调查的业务流程,研究针对采用便携式PDA进行外业数据采集的原始数据的处理系统。通过以北京二类清查工作为试点,研制并建立了一套适合于森林资源二类清查野外调绘中利用PDA进行采集的数据的处理修正系统,通过与先进的外业方式相配合,可大大提高工作效率。