摘要：为建立生牛乳中白色念珠菌和近平滑念珠菌的快速检测方法,根据GenBank已公布的基因序列分别设计2种念珠菌的种特异性引物,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法检测目标菌的基因组DNA,并进行特异性、敏感性和重复性试验,用该方法对含有目标菌的生牛乳样本进行检测。结果表明,该方法特异性强,与对照菌株光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌和烟曲霉等病原真菌无交叉反应;灵敏度高,对白色念珠菌和近平滑念珠菌的最低检出量均为10 CFU/mL;重复性好,T m值和Ct值变异系数分别在0.1%和2.5%之内。该方法操作简便、耗时短,2 h^3 h即可完成整个检测过程。建立的方法能用于生牛乳中白色念珠菌和近平滑念珠菌的一次性快速、准确和定量检测。

摘要：由于禽类念珠菌种类多样,具有条件致病和感染症状非典型的特性,在临床上区分定植和感染状态并确诊何种念珠菌感染是困难的。为了快速准确地检测禽类念珠菌感染和鉴别病原种类,本研究借助Primer Express 6.0软件设计目标念珠菌基因组DNA的种特异引物,采用real-time qPCR技术,通过检测不同念珠菌种的菌株培养物而建立鉴别方法,并用人工感染鸡的血液和肝脏样本对建立的方法进行检验。结果,成功找出三种念珠菌(白色念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌)的3对特异引物和1对共用引物;特异引物分别形成相应种的特异熔解曲线,共用引物形成对应于3个种且明显分开的三条熔解曲线,与参照病原菌无交叉反应;该方法对念珠菌样本检测最低限度可达1×10~1copies/L以下,敏感度高于常规PCR约100倍以上;同种念珠菌不同模板浓度Tm值不变,同一浓度3个重复C_t值的变异系数小于2.5%,说明离散度较低,重复性好。所建方法可以通过对感染鸡的血液和肝脏样本的检测确定目标念珠菌感染和病原种类,检测周期约2~3 h。综上,通过适当的引物设计,采用定量PCR技术可以在一定范围内快速、准确、定量地检测和鉴别感染样本中的目标念珠菌种类。

摘要：为了建立鸡肉中沙门菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌和肠球菌等病原菌的快速检测方法。设计4种病原菌特异引物,建立多重SYBR Green Ⅰ定量PCR方法,对河北地区销售的鸡肉进行检测。结果,建立了多重定量PCR方法,与大肠杆菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、志贺菌、绿脓杆菌、链球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌、阴沟肠杆菌等菌无交叉,最低检出浓度为10CFU/m L,重复试验的变异系数为0~0.1%。销售鸡肉中金黄色葡萄球菌、沙门菌、奇异变形杆菌、肠球菌的检出率分别92.1%、88.1%、72.3%和11.9%。本研究建立的多重定量PCR方法敏感、特异、稳定,可用于鸡肉中沙门菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌和肠球菌的快速检测。

摘要：为建立光滑念珠菌快速准确灵敏的检测方法,根据GenBank已发表的光滑念珠菌rDNA内转录间隔区核苷酸序列设计1对特异性引物,应用SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测光滑念珠菌,对临床分离的多株不同来源光滑念珠菌病料进行检测,通过临床常见的5种病原真菌对该方法的特异性进行检验,并用人工感染小鼠的血液、肝脏组织样本对所建方法进行检验。结果显示,该方法灵敏度高,光滑念珠菌的最低检出浓度为10 copies/μL,特异性强,与白色念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、烟曲霉菌等病原菌无交叉反应。该方法操作简单,耗时短,只需1 h即可完成全部检测过程。上述结果表明,SYBR Green荧光定量PCR可应用于光滑念珠菌早期侵袭的快速检测,为光滑念珠菌病的及时正确防治提供了可靠依据。

摘要：本文通过运用知识图谱绘制工具CiteSpace及CNKI计量可视化分析功能,对我国儿童玩具设计领域的研究脉络进行梳理,通过分析年发文量走势、核心作者及研究机构合作情况,探析儿童玩具设计的研究趋势,同时通过关键词共现分析、聚类分析和突显分析,探究儿童玩具设计的研究热点及发展动态,旨在为后续研究提供思路。

摘要：优化了顶空固相微萃取与气质联用技术(SPME-GC-MS)以内标法测定发酵乳制品中丁酸含量的萃取方法。以5株乳酸菌发酵脱脂乳所得发酵乳制品为原料,采用四因素三水平Box-Behnken中心组合实验设计,以丁酸浓度为响应值,采用响应面法分析优化发酵乳制品短链脂肪酸丁酸定量检测方法的最优萃取条件。得到最佳萃取条件:萃取温度48℃、萃取时间28 min、加盐量为1.65 g、样品质量为5.8 g。并用优化后的检测方法测定5株乳酸菌发酵脱脂乳所得发酵乳的挥发性成分及丁酸产量。

摘要：今年理科综合全国Ⅰ卷的物理实验题,设计巧妙考查全面,特别是对实验电路的设计能力进行了很好的考查。通过对试题的已知条件的细致分析,提出对公布的标准答案的可商榷之处,并提出了另一种可选择电路设计方案,作为标准答案的非常好的一种补充和完善,同时对标准答案也作出进一步的合理解释。

摘要：作为数字经济时代的关键基础设施,数据中心的能耗和碳排放问题将日益突出。为全面揭示全球数据中心的研究进展,提出基于综合能源系统视角的知识图谱科学计量方法。该方法从研究趋势、理论方法及工程案例等多维度对数据中心综合能源系统的最新研究进行分析。首先,对全球数据中心能量研究领域科技论文的国际合作情况、分布特征及研究热点进行定性与定量分析。对采用能源梯级利用、多能互补以及源网荷储一体化的数据中心综合能源系统进行研究,并对其规划设计、运行评价、计算求解进行分析。分析发现,数据中心能源系统正不断走向包含经济和低碳的多维度全局优化。最后,鉴于传统数据中心综合能源系统评价指标——电能利用效率(PUE)的局限性,提出了新的评价指标及体系。

摘要：外军中高级军官继续教育的目的,主要是培养和提高军官的军事专业水平。因此他们的学制都较短,教学内容和课程设置都具有较强的针对性。中级军官继续教育的重点突出联合战役作战指挥能力培养和重视领导艺术的强化,高级军官继续教育的特点是突出战略决策能力的培养。

摘要：城市化进程的加快使得国家对城市建筑的要求提高,而无障碍设计则以其"以人为本"的设计思想走入大众视野。老年公寓作为"弱势群体"集中地区,尤其需要完善的无障碍设施为其生活提供便利。本文通过对哈尔滨市老年公寓的走访,以南岗区某老年公寓为典型案例,就该老年公寓已有的无障碍居住空间存在的问题进行分析,从老年人未来几十年的身体变化情况出发,结合特殊的地理环境,对该老年公寓的无障碍居住空间的优化设计进行探讨,弥补原有设计的不足。