摘要：目的探讨常见炎性细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4对人骨髓白血病细胞HL-60中B细胞活化因子（BAFF）表达的影响及其可能的分子调控机制，为研究BAFF异常表达调控在骨髓白血病发病过程中的作用提供实验依据。方法以细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4刺激体外培养的HL-60细胞1～3d后，流式细胞术、ELISA和荧光定量RT-PCR方法检测BAFF的核酸和蛋白表达含量的变化。并对人BAFF基因上游的启动子序列（-1349～-329bp）进行5’系列基因缺失研究，组成5个不同长度的含报告基因的重组体，瞬时转染至HL-60细胞，经上述细胞因子干预后，报告基因测活技术观察各重组体启动转录活性的变化。结果细胞因子IFN-γ、IL-10干预后，HL-60细胞中BAFF的核酸和蛋白表达含量均明显升高（P〈0．05）；IFN-γ、IL-10均能明显上调人BAFF基因启动子的转录活性（P〈0．05），且其在转录水平的有效调控区域为序列-929～-719bp。结论细胞因子IFN-γ、IL-10可能通过上调BAFF基因转录来促进HL-60细胞对BAFF核酸和蛋白的表达。

摘要：B细胞活化因子(BAFF)的异常表达与骨髓瘤、淋巴瘤的发病相关,为探索常见炎性细胞因子是否能影响人骨髓白血病细胞HL-60中BAFF的表达,以细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4刺激体外培养的HL-60细胞1~3 d后,采用流式细胞术、ELISA和荧光定量RT-PCR方法检测BAFF的核酸和蛋白表达含量的变化。结果显示,细胞因子IFN-γ、IL-10干预后,HL-60细胞表面BAFF蛋白表达水平、细胞上清液中BAFF蛋白含量、细胞内BAFF mRNA的含量均能明显升高(P<0.05),其中在INF-γ、IL-10干预的第1天,HL-60细胞内BAFF mRNA的含量为最高;在干预的第2天,HL-60细胞的上清液中BAFF蛋白含量及细胞表面BAFF蛋白表达水平均达最大值;而IL-4干预HL-60细胞后,仅对细胞上清液中BAFF蛋白水平稍有降低(P<0.05),细胞表面BAFF蛋白表达水平和细胞内BAFF mRNA的含量均无显著性差异。研究提示,INF-γ、IL-10可能是通过促进HL-60细胞对BAFF核酸的表达来上调BAFF蛋白的合成与分泌,而IL-4则仅能一定程度的降低HL-60细胞对BAFF蛋白的分泌...

摘要：目的探讨干扰素（IFN）-γ、向细胞介素（IL）-10和IL-4对人B细胞活化因子（BAFF）基因启动子转录活性的影响。方法以人基因组DNA为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增获得含BAFF基因完整启动子序列的-1349—329bp片段，与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因组成重组体phBAFF1．02，瞬时转染至人骨髓白血病细胞株HL-60，经上述细胞因子干预后，CAT-酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CAT活性，观察重组体的启动转录活性的变化。结果5ng／ml的IFN-γ、100ng／ml的IL-10分别使重组体DhBAFF1．02的CAT活性升高4．18、2．13倍，而浓度为100ng／ml的IL-4则不能改变重组体的CAT活性；联合应用IFN-γ和IL-4、IL-10和IL-4仅能使重组体的CAT活性升高3．41、1．58倍，与单独应用IFN-γ、IL-10相比，CAT活性差异有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞因子IFN-γ、IL-10能明显上调人BAFF基因启动子的转录活性，IL-4对BAFF基因启动子的转录活性无影响，但能明显减弱IFN-γ、IL-10对BAFF基因启动子的促进作用。

摘要：为探索与自身免疫病发病密切相关的B细胞活化因子(BAFF)基因高水平转录的启动序列及IFN-γ等炎性细胞因子对其活性的影响,以人BAFF基因转录起始点上游-1 349 bp至-329 bp的片段为靶序列,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成5个重组体,脂质体转染法转染上述重组体至人骨髓白血病细胞株:HL-60,CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性;同时加入细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、重组人BAFF蛋白(rBAFF),以测定其对BAFF启动序列的影响。结果表明,-1 349^-329 bp、-1 349^-743 bp序列具有强启动调控活性,而-1 349^-1 099 bp片段启动活性最低。细胞因子IFN-γ、IL-10和rBAFF均能在一定程度上调人BAFF基因的启动活性,IL-4则一定程度地抑制BAFF基因的启动活性。研究提示,人BAFF基因-1349^-743 bp片段是进一步研究BAFF基因转录相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列。细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、rBAFF可以一定程度的在转录水平影响BAFF合成和分泌。