摘要：目的:基于多酶恒温快速扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)与封闭式侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)联用技术,建立肉制品真实性快速检测方法,解决实验室方法不适于基层与现场快检需求的问题。方法:通过GenBank筛选猪、牛、羊、鸡、鸭线粒体基因的特异序列,使用DNAStar Megalign软件比对种内保守、种间特异的靶片段,依据MIRA引物探针设计原则设计靶基因引物探针组,通过阳性对照、阴性对照、空白对照等方式系统筛选引物探针,确定猪、牛、羊、鸡、鸭的专属性引物探针,并采用反应体系、反应温度、反应时间筛选,优化完善特异性检测方法。对方法进行系统的方法学考察,包括DNA提取、灵敏度、检出限、假阳性与假阴性考察等,验证方法的有效性。结果:使用建立的方法与实时荧光聚合酶链式反应检测进行比对分析,方法的平均假阳性率为3.49%、假阴性率为3.54%,符合现场快检方法的要求。结论:本研究建立了牛、羊、猪、鸡、鸭5种常见肉类的MIRA-LFD技术,并证实了其有效性和可行性,实现了肉制品真实性的现场快检。

摘要：根据Genebank中猪、牛、羊的线粒体细胞色素b(Cyt-b)基因序列,设计了猪、牛、羊的通用上游引物和特异性下游引物,通过调节引物比例、反应体系、反应条件以及模板量等优化实验确立了多重PCR检测方法。研究结果显示,该多重PCR方法能够同时扩增样品中猪、牛、羊成分,对混合样品的检出限可达10%;并将该方法用于成都市猪、牛、羊肉的调查研究,得到了理想的结果。

摘要：在高速公路建设过程中不可避免地会产生大量废弃土方,且因远运成本高,往往就近废弃。但弃土场常常不被重视,在施工过程中或施工完之后会暴露出许多问题,例如违法用地、环保问题、稳定性差、排水措施不完善等,造成较大隐患。以桂北山区某高速公路K18+700右侧弃土场为研究对象,通过现场实际调查、测量及使用SLIDE建模,针对该弃土场的稳定性及排水措施合理性进行相关计算分析,综合研究其稳定性。结果证明,该弃土场稳定性好,排水能力满足要求,加之完善了弃土场绿化设施,可减少雨水冲刷,更有利于弃土场稳定性。

摘要：过敏原风险问题已成为重要的食品安全问题,如何快速准确地检测出食物中的过敏原成为当前亟需解决的关键。目前常用的过敏原检测方法有免疫学检测、质谱及SPR等技术,但这些方法均有一定程度的局限性。通过引入分子生物学鉴定手段,建立小麦、榛子的过敏原基因数据库,并依据数据库寻找特异性序列并设计探针引物,建立一种快速、便捷、高效的过敏原检测方法,并适当调整了方法的检出限,降低了检测误判的风险。通过建立实时荧光PCR方法,可快速筛选样品的过敏原基因,简化了食品中过敏原成分的鉴定,降低了实验成本与技能要求,降低了检测的难度,缩短了实验时间。通过适用性验证与检出限验证实验,该方法用于过敏原成分鉴定可以达到理想的效果,重复性好,准确率高,检出限为1%。

摘要：目的:建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,用于湖北麦冬的分子鉴别。方法:在ITS 2区设计湖北麦冬、短葶山麦冬和麦冬的通用引物,经PCR反应后,对PCR产物进行限制性内切酶(Nae I)的酶切反应,酶切条件为37℃孵育60 min。结果:设计的通用引物对湖北麦冬和麦冬均能扩增出377 bp的单一条带,经酶切反应后,湖北麦冬被切为231 bp和146 bp 2条条带,麦冬仍为377 bp的单一条带,以此实现湖北麦冬的分子鉴别。结论:建立的PCR-RFLP方法能够实现湖北麦冬的准确鉴别,且该方法操作简单,特异性强,稳定性好,检测结果客观易判读。

摘要：目的 建立基于PCR的三七真伪检测方法,并对三七粉进行检测。方法 对三七及其伪品的序列进行比对分析,在ITS区设计多组三七的特异性引物,对引物进行筛选,并对PCR反应条件进行优化,建立了三七的DNA检测方法。结果 建立了三七的DNA检测方法,并利用该方法对市场购买的三七粉进行检测,均能检测出三七药材成分。结论 该方法操作简单、特异性强、重复性好。

摘要：以海狸鼠和其他物种的细胞色素b基因为目标基因,通过序列比对在碱基差异明显的区域设计海狸鼠的特异性引物,并通过退火温度、反应循环数、方法检出限和特异性等参数的考察建立海狸鼠源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴别方法。结果显示:该PCR方法对海狸鼠能够扩增出约599 bp的条带,对其他物种无任何扩增现象,且在鸡肉和兔肉中对海狸鼠成分的检出限可达到0.1%。这表明该方法有较好的特异性和较高的灵敏度,能够满足海狸鼠源性成分的检测要求。

摘要：通过牦牛与其他常见物种的细胞色素b基因序列进行比对,设计牦牛的特异性引物,并进行聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)体系中不同条件、参数的考察,建立肉及肉制品中牦牛源性检测的PCR方法。该方法具有较好的专属性,建立的PCR体系仅对牦牛源性有扩增现象,而对其他物种无扩增,且对牦牛源性的检出限可达到1%。能够满足检验机构或生产企业对肉及肉制品中牦牛源性的检测需求。

摘要：本实验根据Genebank中人胎盘中的受孕相关血浆蛋白基因序列,设计了用于紫河车真伪鉴定的特异性引物;同时根据猪、牛、羊的细胞色素b(Cyt-b)基因序列,设计猪、牛、羊的通用引物,以鉴定紫河车样品是否含有猪、牛、羊源的胎盘基因,从而确定所检测样品的真伪及掺假鉴定。研究结果显示,该PCR技术能够准确鉴定样品真伪及是否掺假,该方法简便易行,专属性强,灵敏度高,可纳入紫河车鉴别标准。

摘要：从地质角度对进行比选的上、下两个坝址进行了论证,从地形地貌、地层岩性、地质构造等基本地质条件和两坝址存在的主要工程地质问题进行论述比选,最终推荐较优的下坝址作为推荐坝址,从地质角度为设计进行坝址比选提供了依据。