摘要：为鉴定临床上常见的3种沙门菌血清型,针对特异性基因invA(沙门菌属)、sdfI(肠炎沙门菌)、Stm4495(鼠伤寒沙门菌)和SPUL-2693(鸡白痢沙门菌)设计引物,利用标准菌株通过优化体系成功建立了沙门菌的四重PCR检测方法。结果显示:该方法特异性好,敏感性高(检测下限:基因组为500 pg/mL,菌液为103cfu/mL);利用建立的检测方法从上海、山东、安徽和辽宁的临床病料分离出63株沙门菌,其中33株为肠炎沙门菌,9株为鼠伤寒沙门菌,2株为鸡白痢沙门菌,其余19株为沙门菌其他血清型。研究表明,该四重PCR检测方法可以准确且高效地检测肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌,为兽医临床沙门菌快速检测提供技术支撑。

摘要：参考GenBank中鸡、火鸡和鸭IL-18基因序列,设计了1对特异引物,以提取的鹅脾细胞总RNA为模板,应用RT-PCR扩增、克隆鹅IL-18基因中间的333bp序列。序列分析结果表明,其与鸭IL-18基因对应序列相似性最高,达99%。参考鸭IL-18全基因序列设计上、下游引物各3条,以梯度PCR探索扩增、克隆鹅IL-18全基因。以上述策略成功扩增、克隆了3个广东地方杂交品种鹅的IL-18基因。序列分析表明,这3个杂交品种鹅的IL-18基因序列一致,长642bp,含一个603bp的ORF,编码200个氨基酸,分子质量为23.2ku。ORFN端的30个氨基酸为前导序列,其余170个氨基酸为功能蛋白序列。在GenBank中注册了第一条鹅的IL-18基因序列,登录号为EF159728。随后,构建了鹅IL-18基因ORF的重组原核表达质粒pET-GIL-18,经诱导表达、纯化获得重组鹅IL-18融合蛋白,并以其制备了兔抗重组鹅IL-18多克隆抗体。

摘要：胞内劳森氏菌是猪增生性肠炎的病原,试验设计4条引物,采用半巢式PCR从目的 DNA中扩增出1317bp的胞内劳森氏菌lscN基因,并进行序列分析。结果表明,lscN与Gen Bank中PHE/MN1-00、N343同源性为99%,是劳森氏菌三型分泌系统组件的编码基因。

摘要：[目的]为深入研究鸭IL-18的基因表达及其生物学活性和分子佐剂的应用奠定基础。[方法]依据GenBank中香港鸭IL-18基因的序列设计1对特异引物,以广东水鸭脾淋巴细胞总RNA为模板进行RT-PCR扩增,克隆广东水鸭IL-18基因并进行序列分析。[结果]测序结果表明,广东水鸭的IL-18基因开放阅读框为603 bp,编码201个氨基酸,分子量为23.2 kDa。序列分析表明,所获得的广东水鸭IL-18基因与GenBank中香港鸭的核苷酸同源性为98.2%,氨基酸同源性为100%。它与鸡和火鸡的核苷酸同源性分别为86.9%和87.1%,而氨基酸同源性分别为96.5%和97.0%。[结论]进化树分析结果表明,鸭IL-18基因与鸡和火鸡进化关系较近。

摘要：本研究参照GenBank登录的鸡白细胞介素15(ChIL-15)基因序列自行设计一对特异性引物,以RT-PCR、基因克隆,重组真核表达质粒构建、表达及试验兔免疫等技术,成功获得粤黄鸡IL-15基因:全长564bp,编码187个氨基酸,与GenBank上已发表的其它品种鸡IL-15基因序列及其推导的氨基酸序列相似性为99.1%～100%;成功构建鸡IL-15基因重组真核表达质粒pcDNA-ChIL-15;成功制备兔抗鸡IL-15多克隆抗体。为进一步研究粤黄鸡IL-15的生物学功能,试验pcDNA-ChIL-15作鸡的各种新型DNA疫苗的分子免疫佐剂等奠定基础。