摘要：本研究旨在检测前列腺癌细胞系中MARCKS基因表达的水平,构建MARCKS基因的表达载体并明确其在细胞中的表达和外源蛋白的亚细胞定位,检测MARCKS基因过表达对PC-3细胞迁移能力的影响。利用Western blot检测MARCKS蛋白在多种前列腺癌细胞系内的水平。根据MARCKS蛋白序列设计合成带有N末端或C末端HA标签的引物,用PCR扩增目的片段并与载体进行连接,进行酶切鉴定及测序比对。将序列正确的质粒转染至PC-3细胞中,采用Western blot检测N-HA-MARCKS和C-HA-MARCKS蛋白并利用免疫荧光染色检测外源蛋白在细胞中的定位。通过Transwell实验检测N-HA-MARCKS和C-HA-MARCKS对PC-3细胞迁移能力的影响。本研究构建了带有不同标签位置的MARCKS基因的表达载体,其中C-HA-MARCKS蛋白分子的质量更高,且C-HA-MARCKS蛋白在细胞膜上定位更明显。N-HA-MARCKS和C-HA-MARCKS均增强PC-3细胞的迁移能力。本研究结果为MARCKS基因在前列腺癌中的作用及其分子机制的深入解析提供了实验基础。