摘要：目的利用5'端锚定引物及多重聚合酶链反应(PCR)技术建立高效、特异性扩增核酸片段的方法,并探讨其在核酸相对分子质量(Mr)标准(DNA标志物)制备中的应用。方法针对常用的pMD19-T载体(2692 bp)序列,利用命令行程序***,结合Primer3及多因素引物特异性评估软件MFEprimer,设计5'端锚定的上游引物和7对扩增不同目的片段的下游引物;其次,以转化有pMD19-T载体的大肠杆菌DH5α菌液为模板,分别进行一至七重PCR扩增;并将扩增产物经2%琼脂糖凝胶分离及凝胶成像仪采集图像分析;最后,评估该方法在核酸Mr标准制备中的应用。结果制备了特异性较好的一至七重PCR扩增产物,可针对不同实验目的进行不同核酸Mr标准的制备。结论建立了一种快速、特异性扩增核酸片段的锚定多重PCR方法,可根据不同实验目的,快速制备出不同Mr标准大小的核酸片段,进一步拓展了PCR技术的应用范围。

摘要：聚合酶链式反应(PCR)作为常规分子克隆技术已在分子生物学的各个领域得到广泛应用。然而,多重PCR技术应用于质粒拷贝数检测的研究尚未见报道。为深入探索多重PCR在质粒拷贝数测定中的应用,首先利用构建的多重PCR引物设计及评估体系分别针对细菌基因组DNA和质粒载体DNA序列设计多重PCR引物;然后以转化有不同质粒载体的大肠杆菌菌液为模板进行多重PCR反应;最后利用凝胶成像仪采集图像后进行积分光密度分析以获得质粒的相对拷贝数。结果显示通过多重PCR得到的质粒相对拷贝数与Real-time PCR和Southern blot的检测结果基本一致,说明多重PCR可用于质粒拷贝数的定性检测。利用多重PCR技术建立了一种便捷的质粒拷贝数检测方法,为在宿主细胞中快速确定克隆载体或表达载体的相对含量提供了参考。

摘要：在分析螺纹插装阀整体结构和工作原理的基础上,建立螺纹插装阀阀套与阀芯间隙变化量在拧紧力矩和热应力作用下的理论计算模型,通过理论计算分析其间隙的变化规律,同时结合有限元分析结果对计算模型进行初步验证。结果表明:该计算模型可以用于分析螺纹插装阀在热应力下的使用性能,对螺纹插装阀的设计使用具有一定的指导意义。

摘要：随着城市化的发展,我国的公路建设发展迅速,但是在其建设过程中由于存在一些不确定因素,导致一些路基质量达不到要求。基于此,文章分析了公路路基设计中常见的问题,提出了在公路工程施工中路基质量的控制措施。

摘要：文章对公路桥梁质量管理的重要性进行了分析,阐述了公路桥梁工程施工技术应用存在的问题,探究了公路桥梁的施工技术,包括公路桥梁施工加固技术、混凝土浇筑、沉降段路基路面施工组织设计、钻孔灌注桩施工技术、高墩施工关键技术。

摘要：外能源转管自动机射速高、驱动耗电功率大,而车载、机载平台提供的电源功率有限。在分析现有外能源转管自动机驱动方式与技术现状的基础上,提出了阀控马达液压驱动与稳速方案,阐述了其系统组成与工作原理,建立了阀控马达的数学模型,设计了恒功率脉冲动力源与基于电液比例节流控制相结合的阀控马达驱动系统,该系统具有耗电功率小、体积小、质量轻等显著特点,成功应用于某小口径外能源转管自动机,有效解决了外能源转管自动机应用于车载、机载平台耗电功率受限的难题,驱动系统刚性大、自动机射速稳定且可调。