摘要：通过重组DNA技术将不同的基因或基因片段融合在一起 ,经表达后可以得到由不同的功能蛋白拼合在一起而形成的新型多结构域的人工蛋白 ,这是一种极具潜在应用价值与理论意义的方法。目前这种方法已被广泛应用于许多领域的研究中 ,并已显示出较高的价值 ,本文尝试对融合蛋白研究的几个领域的发展情况进行综述。

摘要：本文分析了已分离提纯的12个抗菌肽的一级结构特征,划分出作为12个抗菌肽基本成分的3类保守氨基酸,确认抗菌肽序列的前半部分对于活性有主要页献。根据Garnier定向信息法分析了12个抗菌肽的二级结构,结果证实了12个抗菌肽均有形成N端螺旋的倾向。这提示了用两亲性螺旋解释抗菌肽的抗菌机制,在此基础上设计了3个新的抗菌肽。理论计算表明:新肽的N端螺旋度增加,而C端螺旋保持完整,推测其抗菌活性应较已知的12个抗菌肽为高。

摘要：昆虫抗菌肽在自然界分布广泛，结构多样，其作用机制尚未确切阐明，但其结构上的某些共同特征与其功能密切相关。同时，对其结构与功能间关系的研究有利于设计合成新的抗菌肽，为以后发现活性更强、毒性更低且作用广谱的抗菌素奠定基础。

摘要：利用PCR扩增得到粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白细胞介素 3(IL 3)完整基因片段 ,将其分别克隆至pGEM T ,构建成GM CSF/IL 3融合蛋白基因 ,DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆至T7RNA聚合酶表达载体pT7zz,得到表达质粒pFu ,经转化至表达宿主E .coliBL2 1(DE3) ,在IPTG诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经SDS PAGE电泳鉴定扫描分析 ,目的基因产物表达量占菌体总蛋白量的 30 %以上 ,目的基因表达产物以包涵体的形式表达。Western blot鉴定表明 ,该表达产物可以与GM CSF抗体及IL 3抗体特异性结合。目的基因表达产物经过包涵体变性、透析复性及柱层析纯化 ,用GM CSF、IL 3依赖细胞株TF 1检测 。

摘要：目的将克隆的抗体轻重链可变区基因拼接成单链抗体基因并将其在大肠杆菌中表达。方法通过RT—PCR从两株抗MagaininⅡ杂交瘤细胞株 (2D1 ,3F8)中克隆出VH 和VL 基因 ,然后利用重组PCR技术 ,将VH 和VL 基因通过柔性肽段(GLY4Ser)3 的Linker拼接成单链抗体基因(ScFv) ,将ScFv克隆到表达载体 pCANTAB5E上并将其分别在大肠杆菌***2151及TG1 中进行表达。结果SDS PAGE和Western blot分析表明 ,ScFv在大肠杆菌***2151中得到了分泌表达。间接ELISA结果显示可溶性ScFv及其表面展示噬菌体均具有抗原结合活性。结论成功地获得了ScFv 2D1和ScFv 3F8基因并在大肠杆菌中得到了功能性表达 ,为新型抗菌肽的设计打下了基础。