摘要：目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)对肺炎相关急性呼吸窘迫综合征(p-ARDS)诊断分级和预后评估的价值。方法采用前瞻性观察研究设计,将2022年1月至2023年8月天津医院ICU连续收治的57例p-ARDS患者作为研究对象,选择同期普通呼吸病房收治的26例肺炎患者和10例体检健康者作为对照。收集3组人群的血清样本,其中p-ARDS组和肺炎组样本于患者入院24 h内获得,采用Luminex?多重检测试剂盒检测各组血清Lp-PLA2、IL-6和IL-8的表达水平。收集p-ARDS组和肺炎组患者基线资料以及入院血常规、生化指标、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和D-二聚体(D-dimer)等实验室资料。按照临床诊断、p-ARDS严重程度和28 d临床结局进行分组比较,通过绘制ROC曲线、Spearman相关分析和Logistic回归分析等方法评估Lp-PLA2对p-ARDS的诊断及预后价值。结果p-ARDS组血清Lp-PLA2水平显著高于肺炎组[(233.67±83.49)ng/mL vs(150.86±39.48)ng/mL,P<0.05],而肺炎组显著高于健康人对照组[(150.86±39.48)ng/mL vs(92.07±12.89)ng/mL,P<0.05]。ROC曲线分析结果显示,血清Lp-PLA2对p-ARDS和肺炎的鉴别能力优于IL-6、IL-8、CRP和PCT等指标,其ROC曲线下面积(AUCROC)为0.781(95%CI:0.685~0.878),Lp-PLA2与D-dimer联合的诊断价值更高(AUCROC=0.897,95%CI:0.832~0.963)。亚组分析发现,随着肺损伤加重,血清Lp-PLA2水平递增,Lp-PLA2与p-ARDS患者PaO2/FiO2比值呈负相关(r=-0.549),但与入院SOFA评分呈正相关(r=0.412)。与p-ARDS生存组相比,死亡组血清Lp-PLA2水平更高[(314.5±43.1)ng/mL vs(174.9±48.9)ng/mL,P<0.001];Logistic回归分析显示校正SOFA评分后,Lp-PLA2与28 d死亡风险独立相关(OR=1.099,95%CI:1.026~1.178,P=0.007),校正IL-8或PaO2/FiO2后可得到类似结果。结论血清Lp-PLA2可作为辅助p-ARDS诊断分级和预后评估的生物学标志物。

摘要：目的在毕赤酵母表达系统中表达蛔虫抗菌肽cecropin P1并检测其生物活性。方法根据毕赤酵母的密码子偏好性,人工设计并合成3条cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到cecropin P1基因,构建重组载体pMD18-T-CecP1。双酶切pMD18-T-CecP1,将cecropin P1基因克隆到载体pPICZα-A信号序列α-因子之后,构建酵母分泌表达载体pPICZα-A-CecP1,用SacⅠ将其线性化后转化毕赤酵母X-33,采用Zeocin抗性筛选阳性菌株并进行诱导表达,发酵上清进行SDS-PAGE分析,抑菌试验鉴定其抑菌活性。结果获得酵母分泌表达载体pPICZα-A-CecP1。SDS-PAGE证实pPICZα-A-CecP1/X-33甲醇诱导产物的分子质量单位为6.3 ku。表达产物对大肠埃希菌DH5α的生长有抑制作用。结论应用毕赤酵母表达系统能表达cecropin P1。该抗菌肽具有抑菌作用。