摘要：目的探讨过表达内皮素受体B(EDNRB)基因对人乳腺癌ZR-75-1细胞活力和细胞周期的影响。方法设计EDNRB基因特异性引物,与GV492载体连接构建含EDNRB基因全长序列的过表达载体,慢病毒包装后转染ZR-75-1细胞,构建稳定过表达EDNRB的乳腺癌细胞系。用半定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测EDNRB mRNA和蛋白的表达水平,用噻唑蓝法检测EDNRB过表达对细胞生长的影响,用流式细胞术检测EDNRB过表达对细胞周期的影响,用蛋白质印迹法检测EDNRB过表达对细胞周期相关蛋白表达的影响。结果未处理组、GV492转染组和GV492-EDNRB转染组的EDNRB mRNA表达水平分别为0.22±0.13、0.13±0.10和1.79±0.12,EDNRB蛋白相对表达水平分别为0.75±0.04、0.80±0.21和1.43±0.10,GV492-EDNRB转染组的上述指标与未处理组和GV492转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。未处理组和GV492-EDNRB转染组的细胞存活率分别为0.98±0.58和0.62±0.15,G1期细胞百分比分别为(52.10±1.25)%和(63.35±1.06)%,抑癌蛋白53(p53)蛋白相对表达水平分为0.19±0.03和0.36±0.05,p21蛋白相对表达水平分为0.42±0.04和0.78±0.17,细胞周期蛋白1(CCND1)蛋白相对表达水平分为0.34±0.11和0.79±0.27,周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白相对表达水平分为0.83±0.14和0.36±0.01,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论本实验成功构建了EDNRB基因过表达的乳腺癌ZR-75-1细胞系;EDNRB过表达抑制了ZR-75-1细胞生长,并将细胞周期阻滞在G1期,其机制可能与p53-p21-CCND1/CDK4通路有关。

摘要：医学遗传学是高等医学教育的专业基础课程,同时也是医学科学领域中十分活跃的前沿学科。BOPPPS是以学生为中心并将课堂教学过程模块化分解的标准教学模式。文章基于BOPPPS教学模式对医学遗传学课程进行教学内容、实践及反馈进行总体设计,探讨和分析BOPPPS教学模式在医学遗传学课程中的应用价值,旨在提升学生的学习兴趣,培养学生的自主学习能力、交互合作能力、医学逻辑思维能力和创新研究能力。

摘要：旨在构建FUT8基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体并观察其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。针对FUT8基因设计3组短发夹RNA序列,退火合成双链DNA,通过连接线性化的p GC-LV-GFP载体,构建mi RNA慢病毒载体质粒,并将其转化至感受态细胞DH5α;测序验证正确后进行FUT8基因慢病毒载体的包装及病毒滴度测定,将获得的重组慢病毒p GC-sh FUT8转染MCF-7细胞,利用Real time-PCR、Western blot分别验证转染后MCF-7细胞中FUT8 m RNA及蛋白的表达,MTT法及克隆形成实验检测sh FUT8对MCF-7细胞增殖能力的影响。测序证实成功构建针对FUT8基因的RNAi慢病毒载体;慢病毒载体经293T细胞包装成功,测定病毒悬液滴度>5×108 TU/m L;荧光显微镜下观察各转染组细胞GFP的表达,转染效率达90%以上;Real-time PCR、Western blot结果显示干扰组FUT8的m RNA及蛋白表达水平较对照组显著降低,其中p GC-sh FUT8-2序列对FUT8基因的干扰效率可达80%,干扰效果最佳,FUT8沉默后MCF-7细胞增殖能力下降。

摘要：目的构建pCI2-EDNRB真核表达载体,探讨EDNRB过表达对MCF-7细胞增殖的影响。方法设计EDNRB基因特异性引物,应用PCR法扩增其编码序列,构建pCI2-EDNRB真核表达载体并转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot分别检测EDNRB的mRNA和蛋白表达;MTT法检测EDNRB过表达后MCF-7细胞增殖能力。结果pCI2-EDNRB真核表达载体成功构建,MCF-7细胞中EDNRB的mRNA和蛋白水平均较对照组明显升高,过表达EDNRB抑制了MCF-7细胞的增殖。结论该研究成功构建了pCI2-EDNRB真核表达载体,过表达EDNRB可抑制MCF-7细胞增殖,这为深入研究EDNRB在乳腺癌中的功能及分子机制打下良好基础。

摘要：在医学遗传学教学中实践信息化参与式教学法,用BOPPPS模组设计和编排医学遗传学课程内容,将蓝墨云班课和微助教引入课堂,帮助教师实现线上和线下学习的融合。在"互联网+教学"的时代背景下,数字终端和网络能助力BOPPPS教学模式的实践和创新。

摘要：目的构建原钙黏蛋白10(PCDH10)基因慢病毒表达载体并建立稳定过表达PCDH10的MDA-MB-231细胞系。方法 2018年6—11月,根据PCDH10基因序列设计引物,应用PCR法扩增PCDH10全长片段,连接线性化的pLV-EF1α-GFP-Puro载体,获得pLV-PCDH10慢病毒重组质粒,测序正确后进行PCDH10基因慢病毒载体的包装及滴度测定。将重组质粒pLV-PCDH10转染MDA-MB-231细胞,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测MDA-MB-231细胞中PCDH10的表达情况。结果测序结果证实成功构建慢病毒表达载体pLV-PCDH10,病毒滴度为5×10^8TU/mL;转染MDA-MB-231细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示PCDH10的m RNA和蛋白表达较对照组高表达。结论成功构建pLV-PCDH10慢病毒载体并建立稳定过表达PCDH10的MDA-MB-231细胞系,为深入研究PCDH10基因在乳腺癌发生发展中的功能提供实验基础。

摘要：随着医学模式的转变以及人类对健康概念的重新认识,传统的'灌输式'教学方式已不适应新的教学要求,成为高等医学教育中能力培养和综合素质提高的主要障碍,因此探讨教学方式方法的变革势在必行.结合临床病例分析的教学方法被认为是行之有效的教学方法,这种教学方法在临床医学教学中已得到较多的应用,最近在基础医学的教学中也有人对这种教学方法作探索研究.医学遗传学是一门与临床有密切关系的学科,为此,我们在教学活动中进行了病例分析教学模式的尝试.