摘要：以网状内皮组织增生症病毒(REV)中国分离株HA9901感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA作为其前病毒基因组模板,根据已发表序列设计合成6对引物,经PCR扩增出6段连续的、相互部分重叠的DNA片段和闭合环形前病毒两末端LTR的连接区段,并分别连入T载体进行克隆、测序.用DNAstar软件对测序结果进行剪辑和拼接,完成了REV第一个中国分离株HA9901前病毒全基因组核苷酸序列.在从截然不同的地区、不同年份、不同禽类分离到的毒株中,将该序列与另两个毒株已完成的全基因组序列的比较表明,REV的整个基因组相对保守,各毒株间对应基因的同源性都在92%以上.其中,从我国鸡体分离到的野毒株HA9901与美国鸡源分离株FA在整个基因组上的同源性均显著高于美国的鸭源SNV株.

摘要：【目的】分析我国ALV-J蛋鸡分离株的来源和进一步演变趋势。【方法】以J亚群禽白血病病毒(ALV-J)蛋鸡分离株SD07LK1感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA作为其前病毒基因组模板,根据已发表序列设计合成9对引物,经PCR扩增出9段连续的、相互部分重叠的DNA片段和闭合环形前病毒两末端LTR的连接区段,并分别连入T载体进行克隆、测序。【结果】用DNAstar软件对测序结果进行剪辑和拼接,首次完成了ALV-J蛋鸡分离株SD07LK1的前病毒全基因组核苷酸序列。【结论】将该序列与另外已完成的全基因组序列的比较表明,ALV-J的整个基因组gag和pol基因相对保守,各毒株间对应基因的同源性分别在95.0%以上,env基因的同源性仅为88.6%～94.0%。

摘要：当我们站在黄星建的作品面前,我们感受到了这种愉悦,他所有作品都在告诉你什么,但又没有明确告诉你什么,但他确实告诉了你些什么.美妙就这样开始向你袭来.人类社会发展几千年始终有两条重要的线索在推动着社会的前进,它们同时存在、互为补充,但也有时单枪匹马奋力向前。当社会平稳、盛世天下时,政体将为主、信仰则为辅。以共推江山社稷前行。当社会动荡、政商不稳时,信仰将作为主角登场。中外历史无一例外,也可以简单总结为人救不了世界神来,神打不下世界人来。在关于信仰的浩瀚的传播和扩散中。

摘要：笔墨是水墨艺术的核心价值,现代新水墨的笔墨则是建立在承袭传统笔墨基础上的新的笔墨价值体系。反传统只是表象,其实质是在新的笔墨手法中寻求单点突破而排斥全面开花,从而以更加强烈的视觉语言实现视觉的冲击力度最大化。复杂的事情简单化,简单的事情复杂化是绘画艺术中的辨证法。米氏的草平面中复杂无比,细看则无一草;米氏的天空清澈透明,细看则丰富无常;米氏之水天上来、落地一镜映人间。

摘要：根据马立克氏病病毒 (MDV)国际参考强毒GA株 pp2 4基因序列 ,设计和合成了一对引物 ,其两端分别含SalI和EcoRI的酶切位点。以CV1988株基因组DNA为模板 ,通过PCR技术 ,扩增其pp2 4基因。PCR产物经纯化后 ,按正确的阅读框架定向克隆到表达性载体pGEX_6P_1中谷胱甘肽转移酶 (GST)基因的下游 ,并用序列测定验证。将重组质粒转化的大肠杆菌BL2 1,在 1.0mMIPTG和 37℃条件下诱导 ,GST_pp 2 4基因获得了表达。诱导菌体的裂解物经 12 %的SDS聚丙烯凝胶电泳 (SDS_PAGE)和Westernblot试验验证 ,得到大小为 4 3kD的融合蛋白 ,与预期大小一致。将该融合蛋白的凝胶带切下研碎后免疫小鼠三次后 ,其血清与MDV感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)

摘要：根据胸膜肺炎放线杆菌A pxⅣ基因设计1对引物,扩增特异的650 bp核酸片段,建立了应用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法。特异性试验结果表明,12个血清型的放线杆菌参考菌株均能扩增出650 bp特异性的核酸片段,而大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪肺炎支原体、伤寒沙门氏菌和支气管败血性波氏杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为500个放线杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省不同地区分离的疑似胸膜肺炎放线杆菌菌株进行检测,结果14株为阳性。对感染猪病变组织的检测结果表明,病变部位不同,胸膜肺炎放线杆菌的检出率不同,其中以扁桃体的检出率最高。

摘要：利用马立克氏病病毒(MDV)疫苗毒CVI988株pp38基因上游启动子区域连续5个碱基的缺失(5′-AGCCG-3′),设计2对特异性引物,建立了能区分MDVCVI988株和MDV其他毒株的PCR诊断方法。该方法对8株MDV毒株(弱毒疫苗株CVI988和814,强毒参考株GA,超强毒参考株RB1B、Md5和Md11,特超强毒参考株648A及1个中国野毒株J-E)的PCR鉴定结果均与预期吻合。以16只疑为MDV感染鸡的脏器组织核酸提取物为模板,用所建立的PCR方法,能从其中7只鸡样品中扩增出特异性条带,其检测结果与细胞分离培养和单克隆抗体的检测结果一致。试验证实,本研究所建立的PCR诊断方法具有良好的特异性和敏感性。

摘要：面对普遍发生的产蛋下降,许多种鸡场或商品代蛋鸡场往往不得不在产蛋期甚至产蛋高峰期用灭活疫苗强化免疫。但过度频繁的强化免疫,常给产蛋鸡的生产性能带来严重的不良影响。合理的免疫程序应是在抗体滴度刚开始下降时即给以强化免疫。本研究试图比较不同统计学方法对抗体动态分析的影响,以期为免疫程序的设计提供参考。分别按不同的统计学设计和分析方法,在一个大型种鸡场的产蛋期对新城疫病毒、H9-和H5-禽流感病毒抗体滴度动态变化做了比较研究。对免疫后抗体动态变化的动态研究表明,用成对数据比较的t-test比按成组数据平均数的t-test更能准确可靠地确定免疫后抗体滴度的真实下降。在开产前用选择的最好的疫苗免疫后,高滴度的抗体水平可稳定地维持21周。在此期间对3种病毒的疫苗均未做任何强化免疫,直到21周后真正开始下降时才实施加强免疫。按此免疫程序,该种鸡群的产蛋率达到了历史最高水平。成对数据比较的t-test既可避免由于技术误差或系统误差产生某时段抗体下降的假象,也可避免由于个体差异而掩盖了幅度不大但确是真实的抗体滴度下降,可以为制定最合理的免疫程序提供科学的数据。

摘要：为了对马立克病毒(MDV)meq基因缺失疫苗株SC9-1与商品化MD疫苗CVI988/Rispens株、814株和HVT FC-126株进行分子鉴别,本研究根据疫苗株SC9-1与其它MD疫苗株的基因组差异,分别针对I型MDVmeq基因以及SC9-1基因组中的禽网状内皮组织增殖症病毒-长末端重复序列(REV-LTR)插入片段,设计三对PCR扩增引物,同时合成针对meq基因和REV-LTR片段的地高辛标记探针,通过PCR扩增和斑点杂交方法区分SC9-1株与其他疫苗株。结果表明,使用针对meq基因的引物F1/R1进行PCR扩增,SC9-1株、CVI988/Rispens株、814株分别扩增出184bp、1 297bp、1 297bp目的片段,HVT FC-126株没有条带;使用针对meq基因的引物F2/R2进行PCR扩增,CVI988/Rispens株、814株均扩增出746bp目的片段,SC9-1株、HVT FC-126株均没有条带;使用针对REV-LTR片段设计的引物F3/R3进行PCR扩增,SC9-1株扩增出512bp目的片段,CVI988/Rispens株、814株、HVT FC-126株均没有条带。同时,使用针对meq基因的探针进行斑点杂交,CVI988/Rispens株、814株均显示阳性结果,SC9-1株、HVT FC-126株均为阴性;使用针对REV-LTR的探针进行斑点杂交,SC9-1株显示阳性结果,CVI988/Rispens株、814株、HVT FC-126株均为阴性。因此,利用本研究设计的特异性PCR引物以及探针,通过PCR扩增和斑点杂交方法可有效区分SC9-1与其他商品化MD疫苗。