摘要：选择蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)磷酸丙糖异构酶(TPI)基因作为靶基因设计引物,以包含TPI基因序列的人工合成质粒为模板,建立基于介导等温扩增(LAMP)微流控芯片的贾第虫检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性和稳定性进行评价。结果显示,建立的贾第虫LAMP微流控芯片检测方法可在30 min内完成核酸的扩增,检测敏感性可达4.0×10拷贝/μl和0.01 ng核酸/μl。隐孢子虫、旋毛虫、艾美耳球虫、戊肝病毒和粪肠球菌核酸均不能扩增,对贾第虫具有良好的特异性。以不同稀释浓度重组质粒为模板进行稳定性和重复性实验,结果显示核酸浓度与反应时间具有良好的相关性,对阳性粪样的检测结果显示扩增信号。建立了基于LAMP微流控芯片的贾第虫核酸检测方法,该方法操作简单、特异性强。

摘要：目的本研究是为了阐明夏季海水浴场中抗生素耐药基因的污染变化情况,以及不同种类抗生素抗性基因的浓度与区域之间的关系,从而对海水浴场娱乐海域存在的健康风险进行评估。方法收集6~8月份各月份青岛第一海水浴场排污口和游泳区的水样,然后采用CN-CA膜对水样中的细菌进行富集,挑选五类抗生素基因(tetA、sul1、ermB、ampC、catA1)设计引物,提取细菌的DNA并采用荧光定量PCR的方法检测是否含有各耐药基因,检测结果代入标准曲线后换算出海水中各耐药基因的浓度。结果本研究表明了排污口和游泳区均检测出这五类耐药基因且排污口的耐药基因总浓度高于游泳区。结论海水浴场娱乐海域存在耐药基因污染情况。

摘要：目的:研究重组嵌合抗原4Aβ15-TF的免疫原性,评估其作为亚单位疫苗的可行性。方法:设计合成了重组融合蛋白4Aβ15-TF的基因序列,插入原核表达载体p TIG-Trx中,用大肠杆菌表达并纯化重组嵌合抗原4Aβ15-TF,与铝佐剂配制成亚单位疫苗免疫C57BL/6小鼠以研究其免疫原性。结果:重组嵌合抗原4Aβ15-TF免疫小鼠后刺激其产生了抗β淀粉样蛋白(Aβ)42的特异性抗体,抗体滴度4次免疫后达到较高水平,抗体亚型主要为IgG1型,并且伴随着少量的IgG2b,T淋巴细胞增殖实验证明免疫后产生了针对辅助性T细胞表位的T细胞免疫反应,不产生针对Aβ42的T细胞免疫反应。结论:大肠杆菌表达的重组嵌合抗原4Aβ15-TF具有良好的免疫原性,能够刺激产生高滴度的抗Aβ42抗体,并且产生的免疫反应主要为Th2型,无Aβ42特异的T淋巴细胞增殖反应。提示它可作为候选疫苗用于预防或免疫治疗阿尔茨海默病。