摘要：利用二氧化碳(CO2)超临界萃取技术提取瑞香狼毒中触杀朱砂叶螨的有效成分并进行工艺优化,研究提取物的杀螨活性。通过对影响提取率的3个因素(压力、温度、时间)进行正交试验设计,优化提取工艺。将优化工艺所得的提取物与传统提取技术(溶剂提取法)所提取的物质进行杀螨活性比较。优选出CO2超临界萃取的最佳工艺是:压强30 MPa,温度40℃,时间1.5 h,使用此工艺不但可以将萃取率由原来的2.06%提高为2.68%,而且杀螨活性也显著提高,LC50由原来的3.818 3 g/L降低为2.436 6 g/L。所以,CO2超临界萃取瑞香狼毒有效成分是一种比较优越的方法。

摘要：采用机率值分析方法处理生物测定数据已有半个世纪的历史,但机率分析存在时间效应与浓度效应相互排斥的缺陷,因此将逐步被TDM模型分析法取代。本研究通过TDM模型和3种S型生长模拟模型,对瑞香狼毒中角鲨烯、β-谷甾醇和东莨菪内酯对朱砂叶螨的触杀活性进行研究。结果表明:不同物质的杀螨率对浓度变化的敏感程度为:东莨菪内酯>β-谷甾醇>角鲨烯。不同活性物质达到快速死亡期的时间分别为:β-谷甾醇第12h,角鲨烯第6h,东莨菪内酯第2h;由TDM模型估计的理论死亡高峰期与试验观察相吻合;由TDM模型估计的不同活性物质LC50值分别为:角鲨烯13.101mg/mL,β-谷甾醇9.288mg/mL,东莨菪内酯1.318mg/mL,分别为机率值法计算所得LC50值的1.321、1.110、1.040倍。本研究中,东莨菪内酯(1.5mg/mL)致死中时LT50值最小,为2.237h,角鲨烯(16mg/mL)LT50值最大,为7.395h。各活性物质在最高试验设计浓度下,采用Gompertz和Logistic模型均能较好地拟合朱砂叶螨死亡时间的分布。其中,Logistic模型的拟合效果最好。对Logistic模型参数分析可知,试验中3种物质对朱砂叶螨均具有较好地防治效果;3种杀螨物质中,东莨菪内酯起效时间最快,作用周期较短;β-谷甾醇起效时间最慢,作用周期最长。

摘要：【目的】拟克隆朱砂叶螨几丁质代谢中的关键基因几丁质酶基因,并对其进行特征分析。【方法】利用转录组拼接技术对朱砂叶螨转录组进行拼接,根据叶螨几丁质酶序列通过BLAST找到朱砂叶螨几丁质酶相似序列,设计PCR引物,进行朱砂叶螨几丁质酶基因克隆,分析其详细特征。利用SWISS MODEL预测其蛋白结构,特别是催化功能区的结构。【结果】测序分析确认为朱砂叶螨几丁质酶基因序列,并提交到GeneBank(KY705296),其开放阅读框为1 875bp,编码624个氨基酸,C端有几丁质结合区。根据新的几丁质酶分类,判定TecCht2为Ⅵ型几丁质酶,其结构具有典型的几丁质酶结构特征。【结论】本研究克隆得到的朱砂叶螨几丁质酶基因,为今后几丁质酶功能和用于害螨防治研究奠定基础。