摘要：木糖还原酶是酵母代谢木糖发酵的关键酶之一。根据已报道的木糖还原酶基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1 110 bp大小的片段。将木糖还原酶基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒p YX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行酶活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,酶活分别为6.513 U/mg和7.080 U/mg,是受体菌W5酶活的1.4倍(NADH)和1.3倍(NADPH),其酶活比为0.919。

摘要：为获得黑曲霉Aspergillus niger HDF05菌株较高的β-葡萄糖苷酶酶活,对其发酵条件进行了优化。采用Plackett-Burman实验设计考察关键发酵操作参数对产酶的影响。继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并结合中心组合实验和响应面对4个显著性因素进行分析。Plackett-Burman实验结果表明,发酵温度、装液量、麦麸和(NH4)2SO4浓度对β-葡萄糖苷酶合成影响显著。通过响应面分析得到一元二阶方程,对方程求解得到优化的发酵过程参数:发酵温度为28℃,装液量为71.4 mL/250 mL,麸皮浓度为36 g/L,(NH4)2SO4浓度为5.5 g/L。采用该优化的过程参数,菌株的最大产β-葡萄糖苷酶活力可达60.06 U/mL,较优化前提高了23.9%。将黑曲霉HDF05产生的β-葡萄糖苷酶用于酸解玉米芯纤维残渣的酶解实验中,可明显降低纤维二糖的积累,48 h内可使玉米芯纤维素残渣酶解得率达到80.4%。

摘要：【目的】应用数学统计法对副干酪乳杆菌HD1.7的固定细胞制备和发酵条件进行优化,以提高细菌素产量。【方法】用26-2部分因子分析法筛选对细菌素产量影响显著的因子,发现海藻酸钠浓度、接种量和发酵时间对细菌素的产生影响显著。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。用Box-Behnken设计确定最佳海藻酸钠浓度、接种量和发酵时间,并进行分批重复发酵。【结果】固定化生产细菌素的最佳条件是海藻酸钠浓度2.8%、CaCl2浓度5%、固定化时间4h、菌体包埋量1/20、发酵时间63h和固定化细胞的接种量8.2%,在此基础上用固定化细胞进行分批重复发酵,每批细菌素的发酵周期为24h。【结论】通过对固定化细胞制备和发酵条件的优化,固定化细胞在327h的分批重复发酵中细菌素的总体产量比游离细胞提高了19%,发酵液中无明显细胞渗漏现象且实现了细胞的重复利用,为细菌素的进一步研究和最终提取奠定了基础。

摘要：[目的]:为了获得一种能同时对高血压和骨质疏松两种疾病有治疗作用的融合蛋白。[方法]:根据大肠杆菌偏爱密码子原则,采用基因工程的方法设计并合成了重组降钙素基因相关肽与鲑鱼降钙素融合基因,并将该基因克隆到pGEX-6P-1表达载体上,将重组质粒转化到BL21中表达。[结果]:通过DNA测序验证目的基因被正确克隆到pGEX-6P-1上。[结论]:大肠杆菌表达载体构建成功。

摘要：将玉米芯粉碎成1～2cm3的颗粒,15g/100mL硫酸喷雾浸润,萃取脱去其中戊糖后进行三级逆向酶解和萃取工艺,得到质量浓度为10.26g/100mL的己糖水解液。利用酒精酵母进行此高质量浓度的己糖酶解液进行发酵,以酒精产率为响应值,对MgSO4、KH2P O4、CaCl2的添加量,以及豆粕水解液、麸皮水解液、酵母泥添加量,共6个影响因素进行Plackett-Burman试验设计,优化其发酵条件。结果表明:Plackett-Burman试验确定MgSO4、KH2PO4和豆粕水解液为显著影响因素,经最陡爬坡和中心组合试验得到得到MgSO40.045g/100mL、KH2PO40.135g/100mL、豆粕水解液7.34g/100mL,在此条件下时发酵结果最佳,实际酒精产率为88.64g/L。

摘要：目的:优化副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)HD1.7发酵产抗菌肽Paracin1.7培养基。方法:采用Plackett-Burman设计,从8个因素中筛选显著的影响因素,然后通过最陡爬坡和Box-Behnken设计进行优化,并用JMP7.01软件分析。结果:用Plackett-Burman设计筛选出影响显著的3个因素——葡萄糖、MgSO4、Mn-SO4,其最佳质量浓度分别为6.5685、0.454、0.01052g/L。在优化后的培养基下,抗菌肽效价达141.648IU/mL,产量比优化前(74.13IU/mL)提高了1.91倍。结论:副干酪乳杆菌HD1.7产生的抗菌肽Paracin1.7对多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌及酵母菌都有抑制作用,可作为新型食品防腐剂。本研究结果为抗菌肽Paracin1.7的工业化生产奠定了基础。

摘要：采用Plackett-Burman(PB)方法和中心组合设计(Central composit design,CCD)对休哈塔假丝酵母Candida shehatae HDYXHT-01利用木糖发酵生产乙醇的工艺进行优化。PB试验设计与分析结果表明:硫酸铵、磷酸二氢钾、酵母粉和接种量是影响木糖乙醇发酵的4个关键因素,以乙醇产量为响应目标,采用CCD和响应面分析法(Response surface methodology,RSM),确定了木糖乙醇发酵的最佳工艺为:硫酸铵1.73 g/L、磷酸二氢钾3.56 g/L、酵母粉2.62 g/L和接种量5.66%,其他发酵条件为:木糖80 g/L,MgSO4.7H2O 0.1 g/L,pH 5.0,培养温度30℃,装液量100 mL/250 mL,摇床转速140 r/min,发酵时间48 h,在该条件下发酵液中乙醇产量可以达到26.18 g/L,是优化前的1.15倍。

摘要：在高等师范院校生物专业的教学中,微生物实验是三年级开设的课程。根据高师的培养目标及微生物实验课的特殊性,在实验课中如何培养锻炼学生独立设计实验的能力,动手准备实验的能力,独立完成实验的能力,分析思考、综合归纳能力及独立解决问题的能力等等,是本门课教学中急待解决的问题。为了使学生获得上述能力,在教学中注重师范性、系统性和实践性,我们在微生物实验课中,创立了“有序链锁式”,即“讲、做、演、帮、习”五位一体的高师微生物实验教学法。经过在五届学生实验课中的尝试,收到了良好的教学效果。

摘要：用RSM法以MRS培养基为基础对副干酪乳杆菌HD1.7的液体培养基进行优化。首先采用Plackett-Burman试验设计筛选显著因子,确定了影响细菌素产生的主要成分:牛肉膏、葡萄糖、酵母粉;运用最陡爬坡试验逼近最大细菌素产生区域;利用RSM法对培养基进行优化。试验结果表明培养基最佳配方为酵母粉0.26%、牛肉膏0.88%、蛋白胨1.5%、葡萄糖2.45%、Mg-SO40.06%、K2HPO40.2%、吐温80 0.1%、MnSO40.005%、NaC l 0%。

摘要：根据基因工程操作方法和植物偏爱密码子原则,设计了鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因,并在融合基因前端加上AMVRNA45'-UTR序列和6×His标签,在融合基因后边加上一个甘氨酸。通过SacI和SmaI双酶切pUC(AMV/CGRP/msCT)获得融合基因,用T4DNA连接酶连到植物表达载体pBI121上,构建重组质粒pBIAMV/CGRP/msCT,再转化到***5α中保存。通过DNA测序验证表达载体构建成功。