摘要：目的研究中国脑膜炎奈瑟菌（Nm）中插入序列IS1301的分布与分子流行病学特征。方法设计IS1301引物，应用PCR方法检测2007年1月至2008年10月收集全国16个省、市、自治区219株Nm菌株的IS1301，对IS1301扩增产物进行DNA测序和序列比对，PCR扩增IS1301阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析及核酸印迹杂交，研究不同Nm菌株中IS1301的分布特征。结果219株Nm菌株中，34株携带IS1301（15．53％），A、B、C群和不可分群的Nm菌株IS1301阳性率分别为11．11％、20．75％、6．17％和28．57％；IS1301扩增产物测序结果与GenBank登记编号Z49092．1的Nm菌株序列相似度为94％～100％，进化树分析可分为两簇；C群Nm菌株与其他血清群菌株IS1301序列存在较大差别；研究的Nm菌株基因组中至少存在6～17个IS1301拷贝，相同PFGE带型Nm菌株所携带的IS1301拷贝数具有多态性特征。结论IS1301在中国Nm菌株中的分布具有遗传多态性。

摘要：目的建立猪链球菌2型多重PCR鉴定方法。方法根据猪链球菌种特异基因16S rRNA序列和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因cps2 J基因序列,设计和合成2对特异引物,通过条件和体系优化,建立多重PCR检测方法。结果猪链球菌2型参考株及18株分离株均扩增到清晰的目的条带,而6株非猪链球菌2型参考菌株不能扩增出目的条带。结论多重PCR可以用于猪链球菌2型检测,特异性和敏感性好,为该病的快速诊断和分子流行病学调查提供了新的技术方法。

摘要：目的研究人源与猪源猪链球菌2型gdh基因序列同参考序列的差异,为猪链球菌2型的诊断方法研究提供基础依据。方法选取猪链球菌2型患者分离株和病猪分离株各1株,根据文献和基因库中的gdh基因序列设计PCR引物,进行PCR扩增;将扩增产物纯化回收,克隆至pMD 19-T载体后进行测序,获得gdh基因序列。结果2株猪链球菌2型菌株的PCR扩增产物经电泳后,均得到1 300 bp左右的目的条带,大小与预测一致;序列分析结果显示,人源猪链球菌2型gdh基因序列GC含量为45.73%,猪源猪链球菌2型gdh基因序列GC含量为45.88%,猪链球菌2型gdh参考序列GC含量为45.81%;人源与猪源猪链球菌2型gdh序列同参考序列相比,一致性均为99.9%;人源与猪源猪链球菌2型gdh序列仅相差2个碱基。结论人源与猪源的猪链球菌2型gdh基因序列高度保守。

摘要：目的克隆表达猪链球菌2型诊断性抗原谷氨酸脱氢酶GDH。方法根据基因库中的gdh基因序列设计PCR引物,自病人分离株2007SF0165基因组扩增GDH的编码基因gdh,克隆至pMD19-T载体后进行测序分析,并且构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化*** BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测。结果 PCR法自猪链球菌2型菌株2007SF0165基因组扩增出约1.3 kb的目的片段;序列分析显示猪链球菌的GDH具有GDH蛋白家族I的典型保守序列;构建筛选的原核重组表达质粒pGEX4T-2-gdh经诱导表达,获得蛋白相对分子质量为45 kDa目的蛋白。结论克隆并表达出猪链球菌2型诊断性抗原GDH,可为进一步研究奠定坚实的基础。