摘要：目的优化复方苦参涂膜剂的中药提取工艺。方法选用三因素三水平正交设计实验,以酸性染料比色法测定生物总碱含量,以生物总碱含量及干膏收率的加权综合评分作为工艺筛选的评价指标。结果 9个实验的平均生物总碱含量为2.29 mg/g,干膏收率为40.02%,平均综合分为83.01,中药浸泡温度对工艺影响显著,最佳提取工艺为加入12倍量60%乙醇溶液,70℃水浴浸泡3 h,提取2次。结论优选的加热浸渍提取工艺方法稳定,工艺简单,提取时间短。

摘要：目的构建卷曲蛋白跨膜受体7（FZD7）基因启动子，并分析其肝癌特异性转录调控活性。方法构建FZD7启动子及FZD7启动子变异体（MutFZD7），并设计合成荧光报告载体pFZD7-绿色荧光蛋白（GFP）、MutpFZD7-GFP。将各重组质粒载体转染至肝癌细胞HepG2、SMMC7721及正常肝细胞1．02中，用荧光显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达。在裸鼠肝癌移植瘤模型瘤体内注射各重组质粒后，制备肿瘤组织冰冻切片并在荧光显微镜下观察GFP表达。结果转染pFZD7-GFP的肝癌细胞HepG2和SMMC7721中均有高强度荧光，且GFP表达率分别为（45．1±3．1）％和（25．3±2．5）％，显著高于L02细胞的GFP表达率[（0．4±0．3）％，P〈0．05]；而转染MutpFZD7-GFP的HepG2、SMMC7721和L02细胞中荧光强度明显较弱，且GFP表达率分别为（21．5±2．7）％、（12．3±2．1）％和（0．2±0．1）％，均显著低于转染pFZD7-GFP的各对应组（P〈0．05）；对照组中，转染对照质粒pFZD7-Luc的肝癌细胞及L02细胞中未检测到GFP的表达，而转染对照质粒pEGFP-N1的各细胞株中均有大量细胞表达GFP。在裸鼠肝癌移植瘤中有相似的结果。结论FZD7启动子具有高度的肝癌特异性活性，T细胞因子／淋巴增强因子（TCF／LEF）转录因子结合位点在其转录调控中发挥关键作用。

摘要：目的采用基因工程技术构建风疹病毒复合多表位肽,探讨其对风疹病毒感染的血清学诊断价值。方法根据风疹病毒主要抗原分子E1、E2,设计并构建风疹病毒复合多表位肽的重组表达载体,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,并用Ni2+螯合柱亲和纯化获得复合多表位肽;经western blot鉴定其对风疹病毒感染后的Ig M阳性血清的免疫反应性;建立基于风疹病毒复合多表位肽的Ig M-ELISA检测方法,用于风疹病毒感染患者中血清Ig M抗体的检测。结果成功构建风疹病毒复合多表位肽,在大肠埃希菌Rosetta中获得了高效表达;纯化后的风疹病毒复合多表位肽经western blot分析显示,复合多表位肽对风疹病毒Ig M阳性血清具有较好的免疫反应性;Ig M-ELISA法检测结果表明,重组的复合多表位肽能够检测出风疹病毒感染后Ig M阳性血清,与Ig M阴性血清不发生反应。结论制备的风疹病毒复合多表位肽具有良好的抗原性,可用于风疹病毒感染患者Ig M抗体的检测,提高风疹病毒感染的诊断效能。

摘要：为了研究就地热再生施工时高温加热(大于200℃)对不同深度老化沥青流变性能的影响,采用红外热像仪测量各个加热阶段的路表温度,分别采用动态剪切流变仪(DSR)、弯曲梁流变仪(BBR)试验测试高温加热后不同深度老化沥青的高低温流变性能。结果表明:加热后的路表温度高达240℃,同一横截面上存在温度离析;高温加热主要使上面层表面2 cm沥青(RS2)发生二次老化,加热后不同深度沥青老化梯度增大;高温加热后RS2的温度敏感性增加,高温性能增强,低温性能衰减较快。结论可为优化就地热再生老化沥青胶结料性能评价提供理论参考。