摘要：为尽快解决严重急性呼吸道综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS,即非典型肺炎)的诊断、治疗和病因问题,以SARS患者群体为研究对象,组织临床研究是必不可少的工作,需要规范化地设计临床研究方案,收集临床资料.我们近期参与了部分SARS临床研究项目的信息收集工作,发现SARS临床研究信息的收集存在一些特殊的难点,与以往临床研究不同,需要采用一些新方法和对策.本文简要介绍我们的想法和做法,供同行参考.

摘要：目的建立单通道双重荧光PCR方法检测寨卡病毒和基孔肯雅病毒,为探索超多重荧光PCR方法奠定基础。方法根据TOCE原理,首先在寨卡病毒的Taq Man探针荧光PCR技术基础上,设计两条含有不同标签序列的杂交探针,通过寨卡病毒毒株选择合适的标签序列,再根据合适的标签序列设计合成两条理论上解链温度不同的检测探针,同样用寨卡病毒毒株评估两条检测探针;接着按相同原则设计合成基孔肯雅病毒的杂交探针和检测探针,进行单管内单通道双重荧光PCR试验。结果标签序列的选择结果表明,只有当标签序列的解链温度低于荧光PCR的退火延伸温度时,阳性样本才能获得相应的扩增曲线;根据合适的标签序列设计合成的两条理论上解链温度不同的检测探针,实际检测时可以在同一检测通道中通过融解曲线分析准确区分。单管双重荧光PCR可准确检测出基孔肯雅病毒、寨卡病毒的毒株和阳性样本。结论建立了一种针对基孔肯雅病毒和寨卡病毒的单通道双重荧光PCR检测方法,为后续多种虫媒病毒超多重荧光PCR检测方法的开发提供借鉴。

摘要：目的:构建蜱传脑炎病毒TBE-E-D3抗原的融合蛋白原核表达质粒GSTpET-30a(+)/TBE-E-D3,在大肠杆菌中诱导表达并用亲和层析法纯化,以获得特异性诊断抗原。方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因克隆技术构建重组质粒,转入大肠杆菌DH5α后经酶切鉴定,将测序正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行亲和层析法纯化,SDS-PAGE分析其表达情况和纯度,间接ELISA法鉴定重组蛋白的特异性和灵敏度。结果:TBE-E-D3基因目的片段以正确的读框插入载体GSTpET-30a(+),通过IPTG诱导在大肠杆菌中正确表达,亲和纯化得到较高纯度的蛋白质;间接ELISA法证明抗原特异性和灵敏度良好,送检的15份阳性患者血清样本中检出10份阳性结果,40份健康人血清样本中检出1份假阳性结果。结论:获得的His-TBE-E-D3融合蛋白具有良好的抗原性,可作为森林脑炎病毒特异性血清学诊断的备选抗原之一。

摘要：目的了解结核病患者结核病防治相关知识水平,为今后更有效地开展结核病防治健康教育工作提供方向和重点。方法采用5阶段分层系统随机抽样方法,在全国抽取19个省60个县/区共144名自述结核病患者。使用统一设计的调查问卷对调查对象进行入户面对面询问式调查。结果患者结核病防治知识核心信息总知晓率为73.4%。66.7%患者知道肺结核病的主要症状为咳嗽咳痰,95.1%患者知晓肺结核病是传染病,82.6%患者认为肺结核能够治愈,84.7%患者知道国家有免费检查和治疗政策。结论应结合检查治疗督导,充分利用媒体和人际传播手段,加强对结核病患者的健康教育。

摘要：目的了解我国农村医生(简称"村医")结核病防治核心信息、政策知晓率以及结核病相关医疗行为和健康教育与健康促进工作现状,为制定结核病健康教育和健康促进工作计划提供依据。方法多阶段整群抽样,全国共抽取45个县270个村的村医326名。使用统一设计的调查问卷对村医进行面对面询问式调查。结果74.8%的村医知道咳嗽、咳痰3星期以上有可能是肺结核,83.1%的村医知道新发现的肺结核病人必须进行6个月以上的规范治疗。93.9%的村医知道在结核病防治所做痰检免费,53.1%的村医知道在结核病防治所获取治疗肺结核的药物部分免费。62.6%的村医发现过可疑的肺结核病人。发现过可疑肺结核病人的村医中,75.0%村医对病人进行了登记,77.0%的村医将其转诊至结核病防治所,20.5%村医将病人转诊至其他医院,2.5%村医没有将病人转诊。57.7%的村医经常主动向村民讲解防治肺结核病的知识。66.9%的村医经常宣传国家防治肺结核病的免费政策。大多数村医拿到过宣传画和折页等宣传材料。结论村医的肺结核病防治核心信息和政策知晓率总体较好。大多数村医能够将发现的病人进行登记并转诊,村医主动向病人宣传结核病知识与政策的比例还较低。

摘要：目的 建立寨卡病毒一步法重组酶聚合酶等温扩增检测方法(reverse transcription recombinase aid amplification,RT-RAA),为国境口岸提供现场快速检测方法。方法 根据寨卡病毒基因组保守片段NS2a设计引物和探针,建立寨卡病毒RT-RAA检测方法。用合成的含有寨卡病毒基因序列的质粒测试方法的重复性和灵敏度,用登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒、乙脑病毒核酸测试方法的特异性。结果 寨卡病毒一步法RT-RAA检测时间短(<20min),对寨卡病毒阳性质粒检测下限为10~3拷贝/μl,重复性好,与登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒、乙脑病毒无交叉反应。结论 建立的寨卡病毒一步法RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,适用于口岸现场快速检测。

摘要：目的了解全国公众结核病知识核心信息知晓情况，为今后更有效地开展结核病防治健康教育工作提供方向和重点。方法采用5阶段分层系统随机抽样方法，在全国抽取19个省60个县／区共69253名城乡居民。使用统一设计的调查问卷对调查对象进行入户面对面询问式调查。结果调查对象的核心信息总知晓率为48．9％。12～19岁组、小学及以下文化程度者、农民和学生知晓率较低。调查对象对肺结核病的传染性、传播途径的知晓率较高，而一半或超过一半的调查对象不知道当地有检查和治疗结核病的专门机构、结核病人应到专门机构检查治疗、结核病可治愈、国家有免费检查治疗政策、不应该歧视结核病人，尤其是对“咳嗽咳痰3周以上或有咯血、血痰症状者应怀疑得了肺结核病”这条核心信息的知晓率只有16．0％。结论应根据当地居民知晓结核防治知识的情况制定地方政策。