摘要：目的：了解新生隐球菌格鲁比变种（ Cryptococcus neoformans var． grubii）两组毒力差异明显的多位点微卫星型（ multilocus microsatellite typing ， MLMT ）菌株间的差异基因，探讨导致新生隐球菌格鲁比变种间毒力差异的相关基因及这些基因的功能。方法根据已有基因组数据，针对可能为新生隐球菌毒力相关的基因设计特异性引物，扩增并测序，通过序列对比分析每个基因在两组微卫星基因型菌株间存在的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms ，SNPs）位点，并对引起差异的蛋白质进行分析和预测。结果在成功测序的11个基因中，除2个基因序列完全相同外，其余9个基因在两组毒力差异明显的基因型菌株间分别存在1～4个规律性SNPs，其中，有2个基因中存在非同义SNPs（ non-synonymous SNPs ，nsSNPs ），这2个基因的编码产物分别为沉默信息调节因子2家族成员HST302和UV切除修复蛋白RAD23。另外，在对RAD23蛋白的系统发育分析发现，与真菌界的其他门类相比，在担子菌纲的多数RAD23蛋白与人类的同源基因亲缘关系更近。结论本研究发现了新生隐球菌两种毒力差异明显的微卫星基因型菌株间具有重要功能的两个差异基因（ Rad23和Hst302），且经预测nsSNPs对蛋白结构和功能均有一定影响，而蛋白的具体功能有待通过各项试验进一步深入研究。

摘要：目的:了解贵阳市在校大学生结核病防治知识、态度行为及影响因素,为高校创新方式开展及时有效的结核病健康宣教提供参考。方法:于2022年3月7日至4月7日,采用多阶段分层整群抽样的方法,抽取贵州医科大学、贵州理工学院和贵阳学院在校大学生2894名开展结核病防治相关问卷调查,实际调查2801名,获得有效问卷共2608份。调查问卷为自行设计的电子问卷,运用χ^(2)检验及多因素logistic回归模型分析知识知晓率的影响因素。结果:贵阳市在校大学生总知晓率为69.14%(27048/39120),核心知识知晓率为79.00%(10301/13040),延伸知识知晓率为64.21%(16747/26080)。单因素与多因素分析表明,性别、年级和专业是结核病防治核心知识(χ^(2)分别为12.376、77.729、38.480,P值均<0.001)及延伸知识(χ^(2)值分别为27.993、21.616、40.999,P值均<0.001)知晓率的影响因素,其中女性(OR=1.462,95%CI:1.242~1.721)、大学三年级(OR=1.291,95%CI:1.039~1.604)、毕业班(OR=2.697,95%CI:2.118~3.435)和医学专业(OR=1.880,95%CI:1.594~2.216)学生的知识总知晓率分别高于男性、大学一年级和非医学专业学生。在对待结核病态度和行为上,96.13%(2507/2608)的学生愿意参与结核病防治知识宣传,积极性高。结论:贵阳市高校学生具备一定的结核病防治知识,和较为积极的防治态度与行为,但仍存在不足,应针对男性、低年级、非医学专业的学生开展更精准的健康教育。

摘要：目的将诺卡氏菌属细菌的一段特异性DNA设计成分子信标探针,用于该细菌的PCR检测。方法将诺卡氏菌属细菌、戈登氏菌属细菌及红球菌属细菌菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况,提取菌株DNA作为扩增模板;设计诺卡氏菌属细菌基于secA1基因的特异性分子信标探针,在实时荧光定量PCR反应译体系中加入分子信标探针,PCR产物进行荧光信号检测。结果诺卡氏菌secA1基因经实时荧光定量PCR扩增后可产生阳性荧光信号,红球菌属细菌及戈登氏菌属细菌的secA1基因、阴性对照实验组及空白对照组经实时荧光定量PCR扩增后不产生荧光信号,为阴性。结论 secA1作为看家基因,是用来进行种水平的鉴定及系统进化研究非常理想的靶分子,而分子信标探针技术可以准确、快速、灵敏的进行诺卡氏菌secA1基因检测。

摘要：目的了解及比较两组毒力差异明显的新生隐球菌格鲁比变种的多位点序列分型(MLST)的特点并进行交配型鉴定。方法采用多位点序列分型(MLST)的方法,设计7个看家基因(CAP59,GPD1,LAC1,PLB1,SOD1,URA5和IGS1)的引物,扩增并分析来源分别为环境和临床的各10株新生隐球菌格鲁比变种的基因型,并鉴定实验菌株交配型,与多位点微卫星分型(MLMT)结果对比,比较不同基因分型方法在分类中的稳定性和可靠性。结果在微卫星分型中为MLMT-36的10株环境分离株,MLST分型为ST-15,而在微卫星分型中为MLMT-13型的10株临床分离株,MLST分型为ST-32,所有菌株交配型均为MAT-α。结论 MLST分型结果与MLMT分型结果高度一致,提示以上两种分子分型技术在真菌分类鉴定研究中可显示对于其分离背景及进化来源的高分辨率及稳定性。