摘要：目的　建立一种快速、敏感的诊断方法 ,用于检测和区分霍乱弧菌O1群古典型 (CVC)、埃尔托型 (EVC)、O139群和非O1非O139群。方法　分别针对霍乱弧菌肠毒素A亚单位 (ctxA)基因、O139群特异基因、霍乱弧菌溶血素A亚单位 (hlyA)基因和毒力协同调节菌毛A亚单位 (tcpA)基因设计引物 ,建立多基因PCR方法。PCR产物经电泳 ,根据扩增条带的大小和数目 ,可检测和区分CVC、EVC、O139群和非O1非O139群。针对ctxA和O139群特异基因分别设计一对内引物 ,建立套式PCR。结果　对分离于患者的 6 0株EVC ,2株CVC ,15株O139群和 30株非O1非O139群进行检测 ,扩增结果与设计均一致。多基因PCR敏感性可达到 10 0cfu ,套式PCR可达到 10cfu。对分离于环境标本的 10株EVC和 15株O139群检测表明 ,前者均为产毒株 ,后者均为非产毒株。结论　该方法快速、特异、敏感 ,具有较大的应用价值。

摘要：本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。

摘要：研究建立了随机引物PCR方法用于霍乱分子流行病学研究 ,其中两组引物针对霍乱弧菌重复插入序列设计 ,一组引物为任意序列。对 2株霍乱弧菌O1群古典型 (CVC)、81株埃尔托型 (EVC)和 10株O139群进行了分析 ,上述菌株经PCR鉴定 ,均携带霍乱肠毒素 (ctx)基因和毒力协同调节菌毛(tcp)基因。 2株CVC分为 2个类型 ,81株EVC分为 14个类型 ,10株O139群分为 3个类型。其中 10株EVC分离于一次霍乱暴发 ,分为 2个类型 ,提示该次暴发可能存在多个传染源。随机引物PCR方法简便、快速、分辨力高 ,在霍乱分子流行病学研究中有较大的应用前景。