摘要：本文对杨树(细菌性)枯萎病菌的培养特征、生理生化特征、分子生物学特征等方面进行了研究与描述,设计并合成了特异性PCR引物,杨树(细菌性)枯萎病菌的PCR产物出现718 bp的特异性扩增条带,而其他近似种的细菌均未出现扩增条带,说明该对引物具有杨树(细菌性)枯萎病菌鉴定特异性,将病菌DNA模板做浓度梯度稀释,灵敏度可达10 pg/μL。该方法快速、灵敏、准确,可用于杨树枯萎病菌检测。

摘要：苹果蠹蛾(Cydia pomonella L.)是重要的国际检疫性害虫。本文根据苹果蠹蛾线粒体COI基因序列设计引物和探针,对苹果蠹蛾及其相似种进行实时荧光PCR检测,结果表明,不同虫态的苹果蠹蛾均能够与近似种类区分开来。该技术可快速准确地鉴定苹果蠹蛾,为检疫性害虫苹果蠹蛾的检疫提供了一种新的方法。

摘要：对腊肠树果实中的重要潜在外来有害生物粗鳞蜡螟(Trachylepidia fructicassiella Ragonot)的幼虫和成虫进行了DNA条形码研究.通过提取粗鳞蜡螟幼虫和成虫样品的基因组DNA,设计ITS1、ITS2、16S rRNA、CYT-B、COⅠ、COⅡ基因引物,PCR扩增并测序,结合Genbank中相关数据,借助生物信息学分析软件对比分析目的基因序列相似性,构建NJ系统进化树,分析遗传进化关系,获取该虫DNA条形码。结果表明,从粗鳞蜡螟幼虫和成虫的快速准确鉴定,获得了其幼虫和成虫多个基因的DNA序列,共计16条。其中,14条为新序列,分析表明这些序列可作为粗鳞蜡螟新的DNA条形码序列,为该虫的识别鉴定和幼虫的早期防治提供基础数据。

摘要：马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)是我国重要的检疫性有害生物。本研究根据PVA中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了两套PCR引物和TaqMan探针,建立了双引物探针RT-RealtimePCR检测PVA的方法。该方法采用实时荧光PCR技术,有效地提高了检测的灵敏度;同时两套引物探针相互验证,有效提高了结果的准确性。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达0.5fg/μL植物总RNA。

摘要：选取霍乱弧菌ompW基因片段,设计链置换扩增(strand displacement amplification)特异性引物,建立霍乱弧菌SDA快速检测方法,同时对设计的引物的灵敏度、特异性进行研究,结果发现所建立的SDA检测技术对霍乱弧菌的检测灵敏度达到7.0×102cfu/mL,特异性检测发现,SDA技术可以特意性地扩增霍乱弧菌。

摘要：本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对NDM-1基因检测具有特异性,最低检测限可达10fg/μL,灵敏度高于普通PCR。提示HDA是一种针对NDM-1的快速、灵敏、便捷的非PCR核酸扩增技术。

摘要：目的建立了一种特异、敏感、快速的玉米内州萎蔫病菌的巢式PCR(Nest-PCR)检测方法。方法根据玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis ***,Cmn)和***种下其他4个亚种细菌Cmm、Cmi、Cms、Cmt的ITS序列差异性基因位点设计Cmn FP-OUTER/Cmn RP-OUTER为外侧引物,Cmn FP-INNER/Cmn RP-INNER为内侧引物的巢式-PCR,并对所有参试菌株DNA和菌悬液进行了扩增。结果经过两轮扩增,能从参试的玉米内州萎蔫病菌中特异性地扩增出1条122 bp的片段,而其他参试菌株没有扩增信号。该巢式PCR检测方法对菌悬液的最低检测限为3.54×102 CFU/m L,检测灵敏度比常规PCR提高了1000倍。结论本研究建立的玉米内州萎蔫病菌的巢式PCR(nest-PCR)检测方法具有良好的特异性和灵敏性,将会在玉米内州萎蔫病的早期诊断及预防传入方面发挥重要作用。

摘要：本研究针对绿豆、豌豆、玉米、红薯与马铃薯这 5个物种的特异基因序列 ,设计出多对引物 ,并分别从每个物种中选择特异与扩增效率最好的一对引物进行实验。通过特异性实验、重复性实验及灵敏性实验后 ,最终获得 5对引物 ,即绿豆引物MP4、豌豆引物PEP2、玉米引物CP1、红薯引物SP2、马铃薯引物POP2。采用这 5对引物进行PCR扩增 ,就可以检测出粉丝中这 5种植物源性成分。本方法准确、灵敏、快速 ,检测的灵敏度达 5 %。

摘要：建立了固相萃取-高效液相色谱法测定运动型饮料中的塑化剂,以正交试验设计得最佳前处理方式,并对7种塑化剂的色谱分离条件进行优化,综合考虑检测波长、流速和梯度洗脱比等因素,得到最佳色谱分离条件为:色谱柱C_(18)(5μm, 150 mm×4.6 mm);流速1.0 mL/min;UV 230 nm;柱温30℃;进样量20μL;流动相乙腈-水,梯度洗脱。分析结果表明,两种运动型饮料中均不含塑化剂成分。利用固相萃取富集、高效液相色谱法检测,该方法操作简便,适用于7种塑化剂的分离检测。